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800电话:800-810-9761 法医DNA分型技术前沿 法医DNA分型技术发展前沿 现有技术的发展 新技术新产品 实验室自动化 未来法医DNA发展趋势 一、现有技术的发展 提供更多信息的STR基因分型试剂盒(新的STR位点、新的生物学特征、血型等) miniSTR试剂盒 SNP技术的发展(能提供肤色、毛发等更多个体信息的单核苷酸多态性位点的发现和技术上的应用) 1. 更多STR位点 兼容已有的数据库信息 一次反应获得更多的信息 更高的个体识别率和非父排除率 13 CODIS CORE STR SITES Amel D2 D19 13 CODIS CORE STR SITES Amel P D P E 13 CODIS CORE STR SITES Amel P D P E D2 D19 SNP分型最新技术 单管双向等位基因专一性扩增 单核苷酸引物延伸分析 (SNPE) 特异等位基因PCR 等位基因特异寡核苷酸片段分析焦磷酸荧光法 Taqman 技术 双色荧光偏振技术 芯片分析 二、新技术新仪器的出现 微芯片毛细管电泳 较短的电泳通道,快速分离DNA片段,速度较传统电泳快10-100倍。 微型热循环仪 仪器体积缩小,减少PCR反应时间,并减少试剂消耗,降低分析费用。 1. 基因芯片技术 DNA芯片(DNA chip)技术是将大量寡核苷酸探针固定于硅片、玻片、聚丙烯或尼龙膜等固相支持物上制成芯片,与标记的样品DNA进行杂交,通过杂交信号强度而获取样品的信息。 该技术应用广泛,具有高通量、高信息量的特性。在个体识别方面,STR芯片、SNPs芯片是研究的热点,一旦得到运用,将可使法医学检验更为便捷、准确、高效。 STR芯片与目前DNA数据库中的遗传标志系统完全兼容, 一旦用于检案和建库,将显示出下列优势: 技术操作简便, 自动化程序高, 检测效率高, 应用范围广, 检测成本低。 2. 基质辅助激光解析电离/飞行时间质谱(MALDI—TOF) MALDI—TOF利用离子进行实际时间的质量测定。 飞行时间质谱具有极高的通量,MALDI—TOF—MS分析可以不使用等位基因分型标准物进行分析,因为此方法分析的是DNA分子的真实质量,使之比电泳中的相对大小测量更准确。 MALDI—TOF的优势和问题 有报道称MALDI—TOF可分析小于150bp的STR等位基因。Gene Trace公司的科学家证明MALDI—TOF分析每天可完成数以千计的单个基因座STR分型。 MALDI—TOF分析法灵敏度高,特异性强,不需凝胶电泳,可以发展为高速检测大量STR的方法。 MALDI—TOF分析STR的PCR产物还存在一些问题,最大的问题是,只能分析片段较短的DNA分子,当DNA分子或样品盐浓度太大时,MALDI—TOF—MS的分辨率和灵敏度下降。 3. 变性高压液相色谱法 变性高压液相色谱(DHPLC)是一种高新的高通量的DNA序列多态性分析技术。是用离子对反向高压液相色谱分离检测异源双链。 该方法的优点是加样和分析的自动化,引物延伸后不需要进行纯化过程,是比较简便的SNP分析方法,而且多个SNP可以复合在一起。 * * 800电话:800-810-9761 基本原理是:对于一个经PCR扩增后具有固定长度的DNA片断,其分子构象是由碱基序列所决定的,因此单个碱基的改变能够引起DNA分子单链或等位基因间形成的错配异源双链在变性条件下存在微小的构象差别,这些不同的构象体在电泳或高效液相检测中因移动性的差异而得以区分。 ,是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值,又具有明显的产业化前景。 分析原理:液体DNA样品与过量的基质复合物结合,如3-羟基甲基吡啶酸(3-hydroxy-picolinic acid),然后将这些样品滴到金属或石英板上,在空气中晾干,DNA和基质形成共结晶,然后把样品板放到质谱的真空环境中进行分析,快速激光脉冲激发离子化过程。DNA分子周围的基质分子保护DNA在离子化过程中片段化。每个激光脉冲激发样品的离子化,然后在飞行管内分离离子。DNA离子按其质量大小先后通过检测器,DNA片段越短,越早到达检测器。移动固定激光束下的样品板顺序分析样品。市场上有样品板销售,一次可以点384个样品,在1小时内分析完每个样品板,分析时间取决于每个样品收集的激光点数和激光脉冲比。 其原理利用不同的DNA链与色谱柱之间的吸附力差异来分离不同的DNA分子。在两个DNA分子没有长度差异时,如果碱基组成不同,他们与色谱柱的吸附力就有差异,吸附力有差异的DNA分
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