化妆品中邻苯二甲酸酯类物质的检测方法- 附件5：.doc

附件5： 化妆品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法 1 范围 本方法规定了测定香水、发胶、指甲油等化妆品中10种邻苯二甲酸酯类化合物的高效液相色谱法。 本方法适用于香水、发胶、指甲油等化妆品中10种邻苯二甲酸酯类化合物的含量测定。 本方法所指的10种邻苯二甲酸酯类化合物包括邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯 (DEP)、邻苯二甲酸二正丙酯（DPP）、邻苯二甲酸二正丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二正戊酯（DAP）、邻苯二甲酸二正己酯（DHP）、邻苯二甲酸丁基苄酯（BBP）、邻苯二甲酸二环己酯（DCHP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DOP）和邻苯二甲酸二异辛酯（DEHP）。 本方法中各种邻苯二甲酸酯类化合物的检出限及取1g样品时的检出浓度见表1。 表1 各种邻苯二甲酸酯类化合物的检出限和检出浓度 物质名称 DMP DEP DPP BBP DBP DAP DCHP DHP DEHP DOP 检出限 / ng 0. 5 0. 5 3 3 3 40 40 40 5 5 定量下限 / ng 2 2 10 10 10 135 135 135 20 20 检出浓度 /（(g/g） 1 1 5 5 5 70 70 70 10 10 最低定量浓度 /（(g/g） 4 4 20 20 20 270 270 270 40 40 2 原理 邻苯二甲酸酯类化合物在280nm处有特征紫外吸收，可用反相高效液相色谱（HPLC）分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。 3 试剂 3.1 甲醇，色谱纯。（溶剂应不含邻苯二甲酸酯类化合物） 3.2 邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二正丙酯、邻苯二甲酸丁基苄酯、邻苯二甲酸二正丁酯、邻苯二甲酸二正戊酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二正己酯、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二正辛酯（纯度97.5%）。 3.3 混合标准储备溶液（(＝1 000mg/L）：分别称取10种邻苯二甲酸酯类化合物标准品0.05g（精确到0.1mg），用甲醇（3.1）溶解，移入50 mL容量瓶中，定容，摇匀，配成质量浓度为1 000mg/L的混合标准溶液。 4 仪器 4.1 高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器，配色谱工作站。 4.2 微量进样器或自动进样装置。 4.3 超声波清洗器。 4.4 高速离心机。 4.5 电子天平。 5 分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品约1g（精确至1mg）于10mL具塞刻度管中，加入甲醇（3.1）至刻度，振摇，超声提取20min，必要时可高速离心。经0.45(m滤膜过滤，滤液作为待测样液备用。 5.2 测定 5.2.1 色谱参考条件 5.2.1.1 色谱柱：C18 柱，250mm×4.6mm，5(m。 5.2.1.2 流动相：A相：甲醇，B相：水，梯度洗脱，洗脱程序见表2。 5.2.1.3 流速：1.0mL/min。 5.2.1.4 检测器：二极管阵列检测器，检测波长为280nm。 5.2.1.5 柱温：25℃或室温（无温控装置时适用）。 表2 流动相甲醇和水梯度洗脱程序（体积比） 时间 / min 0 12 15 22 23 25 甲醇+水 75+25 75+25 100+0 100+0 75+25 75+25 5.2.2 校准曲线的制备 移取邻苯二甲酸酯类化合物标准储备溶液（3.3）0mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL于10mL具塞刻度管中，用甲醇（3.1）稀释至刻度，摇匀。此时溶液中各组分浓度分别为0 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L、600 mg/L和800 mg/L。在设定色谱条件下，分别取5(L进行HPLC分析。根据标准系列质量浓度和峰面积，绘制校准曲线。 5.2.3 样品测定 在设定色谱条件下，进5(L待测样液进行高效液相色谱分析。若样品中待测组分含量过高，应用甲醇稀释后测定。色谱图检出的物质，经与该物质的标准紫外光谱图比较确证后，根据峰面积，从校准曲线上查得相应组分的质量浓度。 5.3 空白试验 除不称取样品外，按以上步骤进行。 5.4 平行试验 按以上步骤，做两份样品的平行测定。 6 结果计算 ( ( V (（邻苯二甲酸酯）= —————— m 式中：(（邻苯二甲酸酯）——化妆品中邻苯二甲酸酯的质量分数，(g/g； ( ——从校准曲线上查得的待测样液中邻苯二甲酸酯的质量浓度，mg/L； V ——样品定容体积，mL； m ——样品用量，g。 7 色谱图 图1 1