拟南芥GASA基因家族表达分析及GASA5功能研究.pdfVIP

摘要 拟南芥GASA基因家族表达分析与GASA5功能研究 专业：植物学 姓名：张盛春 导师：王小菁教授 摘要 成花诱导中起重要调控作用。近年来， GA受体GIDI和关键因子DELLA蛋白 的发现使GA信号转导途径的研究取得了重要进展，进一步分离鉴定DELLA蛋 in 现15个成员。本研究对拟南芥GASA基因家族进行了生物信息学分析和表达模 式的整体研究，在此基础上进一步对GASA5基因的功能进行了详细研究并探讨 该基因与DELLA蛋白的关系。主要取得了以下结果： l、根据G么．跚基因的蛋白保守性把15个拟南芥GASA基因分成了I、II、III三 个亚家族，其中亚族II成员都含有2个外显子，亚族I的成员大部分含有3 个外显子。预测所有GASA蛋白的N端均有一可剪切的信号肽，C端含有 60个左右氨基酸的GASA保守结构域，GASA结构域中含有12个位置保守 GASA9以及没有跨膜结构的GASA蛋白则均位于细胞膜外。启动子分析发 现，绝大多数GASA基因上游启动子区域至少含有1个GA顺式作用元件 摘要 GARE以及1个脱落酸(ABA)作用元件ABRE。 2、利用基因启动子驱动GUS报告基因的方法，研究了基因的时空表达模式。发 现G么劂基因的GUS染色基本上集中在根、子叶、下胚轴、维管、茎尖、叶、 花、离层区以及种子等器官中。RT-PCR检测GASA基因在拟南芥不同组织和 器官中表达的结果与启动子驱动GUS的研究结果基本一致。 GA3的抑制，PAC处理对这几个基因的表达的促进作用很微弱。GA3对 有拮抗作用，它可诱导GZ剐2圬、G彳黝5和GASAl4的表达，其中对G彳删2乃 表达没有明显影响。 受DELLA的促进，而GASA4和GASA6则受DELLA的抑制。 5、GASA5基因在拟南芥的根、茎、叶、花、荚果等组织中均有表达，特别在茎 尖分生组织中表达明显。利用GASA5．GFP在洋葱表皮细胞瞬时表达实验和 拟南芥稳定表达实验发现，GASA5蛋白定位于细胞膜外。 证实提前开花是由于GASA5缺失而引起。外源GA3能够减少甚至消除不同 GASA5基因型问丌花时间的差异，春化作用则不影响gasa5．，的提前丌花， 因此认为GASA5通过GA途径影响拟南芥开花。 7、分子生物学和遗传学实验表明，GASA5主要是通过抑制刀基因和LFY基因 的表达从而抑制开花， GASA5还能促进FLC基因的表达。 8、gasa5．J的花序轴生长速率要比野生型拟南芥快，而35S：：GASA5的花序轴生 长速率比野生型慢。组织切片观察证实，GASA5主要是通过抑制细胞的伸长 而抑制花序轴的生长速率。外源GA3能够消除GASA5对花序轴生长速率的 摘要 抑制作用。 不受影响。进一步研究发现，在gasa5．J缺失突变体中GAI基因的表达下降， 进行杂交的实验结果也证实了这一点。 10、GASA5的表达还受水杨酸、过氧化氢、高温等胁迫处理的促进，低温则抑 制GASA5的表达。初步研究发现在28C处理下gasa5．，清除过氧化氢的能力 加强，并且发现gasa5．，对ABA的敏感性降低，因此GASA5可能与生物和 非生物胁迫有关，需进行更深入细致的研究。 关键词：GASA基因家族，表达模式，GASA5，开花，花序轴生长，赤霉素 ABSTRACT ofGASA in analysis genefamilyArabidopsand Expression functionalonGASA5 study Major：Botany