真空法测定沥青混合料最大相对密度.docVIP

真空法测定沥青混合料最大相对密度.doc

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真空法测定沥青混合料最大相对密度

检测仪器 XC5R HLM-3型沥青混合料最大相对密度仪技术参数 最大理论相对密度仪2013年新标准专先生联系!原来可以更省钱! 技术参数: 电源电压:220V10%; 抽气功率160W; 工作方式:手动/自动; 震动机功率30W; 容器容积:4300mltimes;2只; 压力范围0-100MPa自动控制。 本仪器适用于真空法测定沥青混合料最大相对密度,供沥青混合料配合比设计,路况调查,计算空隙率,压实度等使用。仪器采用进口无油真空抽气泵,震动电机,两个真空容器等组成,仪器使用可优于进口仪器 酶的专一性在生物进化上演化了上百万年,抗体的专一性的形成只需要几个星 期而已。 现在我们可以借助物理和合成化学的发展,利用免疫系统巨大的细胞和分子网 络产生催化抗体。 在70~80年代,W.P.Jencks预言,抗某个反应过渡态的抗体具有催化该反应的 能力。 1975年前后,抗体酶处于探索的开始阶段,一般采用诱导法、引入法进行尝试, 一般效率很低,有的还测定不出活性。 1975年时,G.Kohleramp;C.Milstein发明了单克隆抗体技术后,就有了后来的抗 体酶。 1986年,美国的Schultz小组研究对硝基苯酚磷酸胆碱脂(pNPPC)相应的羧酸二酯水解反应的过渡态类似物时,推测用这个过渡态类似物作半抗原。 这样的分析,后来的确从中选出了两株有催化活性的单克隆抗体,一株MOPC167的水解速度达到了1.2x103倍。 经过测定,这个抗体酶符合米氏方程,具有底物专一性、pH和需要一定的温度等酶的催化特征。 结果表明底物类似物的结构与抗体酶有关。 另一实验:合成一个含吡啶甲酸的磷酸酯化合物用这个过渡态类似物作半抗原免役小鼠,得到12株单抗。 结果:3株有抗体酶活性,其中一株6D4能与半抗原分子结合外,还能催化不含吡啶甲酸的相应磷酸酯化合物水解,速度快103倍,具有底物专一性和对pH的依赖性。 用半抗原可以竞争性地抑制这个反应。还发现单抗的结合位点的氨基酸改变,可以影响它的催化活性。 抗体酶的特点: 在专一性方面超过或相当于我们讲的普通酶。 在反应速度方面接近普通酶。更多的为低些的抗体。 原因:因为抗体酶没有结构的诱导等动态变化;产物释放困难;底物、产物的 交换困难等。 1、能催化一些天然酶不能催化的反应 q有许多化学反应还没有已知酶催化进行 q抗体的多样性决定了抗体酶催化反应类型多样性 q抗体酶可以根据需要人工裁制 抗体酶的催化反应类型 u转酰基反应 u水解反应 uClaisen重排反应 u酰胺合成反应 uDiels-Alder反应 u转酯反应 u光诱导反应 u氧化还原反应 u脱羧反应 u顺反异构化反应 2、有更强的专一性和稳定性 q抗体的精细识别使其能结合几乎任何天然的或合成的分子 q抗体酶催化反应的介质效应 半抗原:一类小分子化合物,本身不能诱导免疫应答,只有当它共价结合到具 有免疫性的蛋白质后,注射动物才能诱导小分子物质的抗体产生。 设计抗体酶的通用模式: 设计一个在空间上和电荷上都与反应过渡态结构相似的稳定分子,以此分子做 半抗原与一载体蛋白共价结合,免疫、诱导产生能结合该半抗原且能催化与半抗原 相应的底物分子转化的抗体克隆,其底物专一性通过对半抗原结构的调整来实现。 1、半抗原设计中应考虑: (1)产生的抗体能否具有预期的催化活性。 (2)能否刺激机体免疫应答。 2、半抗原结构与催化抗体之间的关系: (1)半抗原结构中应含有芳香结构(具较强的免疫原)。 (2)催化抗体和半抗原的亲和力。 (3)诱导羧酸酯、酰胺水解的催化性抗体,可利用其具有四面体结构的高能过 渡态类似物为抗原。 (4)半抗原设计应考虑催化反应的环境与反应机制。 二、抗体酶如何生产? 1、拷贝法:用已知的酶作为抗原对动物进行第一次免疫,获得抗酶抗体;再 用抗酶抗体作为抗原进行第二次免疫获得抗抗体,抗抗体实际上就是具有原来酶活 性的抗体酶。 优点:可以大量生产单克隆抗体酶 缺点:有相当大的盲目性和偶然性,并不能产生新酶。 2.诱导法或者细胞融合法: 先用特定的半抗原(过渡态底物决定)与载体蛋白相连(如牛血清白蛋白等),此 偶联的物质作为抗原免疫动物,产生抗体产生抗体的脾脏细 胞与骨髓融合,然后在体外培养,杂交体克隆化,然后繁殖成单一细胞或菌落单一 细胞或菌落产生抗体。用标准单克隆抗体技术来制备、分离、筛选抗体酶。 我们知道过渡态复合物是个不稳的中间态形式,有些只是理论推测,其结构我 们还不知道,所以这里第一步是正确的过渡态复合物的设计。 如酯水解的过渡态复合物是个带电的四面体结构,想法设计一个带电的磷酸酯 为过渡态复合物,其中苯基和苯酚基可以改变,也就可以制造各种结合专一性抗 体酶。 例子

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