融合蛋白hPTH134abHSA的真核表达及活性初步评价.pdfVIP

摘要 摘要 Parathyroid 人甲状旁腺激素(human 一种单链多肽激素，由84个氨基酸组成，是人体内调节骨代谢的重要激素之一，其类 似物已被开发成为治疗骨质疏松症的一系列新型药物。研究表明，hPTH前34位氨基酸 Serum I刍(Human 活性，延长其在人体内的半衰期，我们先将hPTH的前34个氨基酸片段的基因串联， 因在毕赤酵母中进行表达，并对得到的融合蛋白进行鉴定、纯化和活性初步评价。 设计特异性引物，得到两个带有不同5’末端和3’末端延长序列的hPTH(1．34)单体基 因片段，重叠PCR技术将二者拼接成二联体，并插入到克隆载体pTGl9．T中，构建重 I和Not hPTH(1．34)ab．HSA的基因，将其在EcoRI酶切位点插入到表达载体pPIC9K中， 地插入到表达载体pPIC9K中；测序结果表明重叠PCR拼接得到的融合基因序列与预期 一致。 I线性化后电击转化毕赤酵母