阵发性睡眠血红蛋白尿重点培训.pptVIP

阵发性睡眠血红蛋白尿 徐 健 山东省立医院 阵发性睡眠血红蛋白尿 阵发性睡眠血红蛋白尿 ( PNH，Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria ) 是获得性造血干细胞良性克隆性疾病。 临床特征： ·　反复发作的慢性血管内溶血 ·　不同程度的全血细胞减少 ·　少部分患者可伴有血栓形成 PNH的发病必须具备两个条件 （内因） ：PIG-A 基因突变所致的GPI-锚链蛋白缺陷的造血干细胞。 （外因）：环境因素下，有缺陷的造血干细胞获得克隆生长优势。 PIG-A 基因突变 GPI-锚链蛋白缺陷 （CD55、CD59等蛋白合成减少） 缺陷的血细胞被激活的补体破坏 血管内溶血、血栓 GPI anchored Proteins Johnson and Hillmen,Mol Pathol, 2002 PNH的克隆生长优势 PNH患者骨髓具有正常及异常造血细胞同时存在（CD59+及CD59-）。两群细胞体外生长能力均较正常对照为低，但PNH患者的异常血细胞比自身正常造血细胞具有一定优势，具有抗凋亡能力。 骨髓受到损伤，正常造血细胞受到抑制时， PNH克隆获得克隆生长优势。 PNH的克隆生长优势 缺乏GPI锚连蛋白的PNH克隆不易被T细胞识别而杀伤 。 GPI锚链蛋白中包含多种造血细胞生长相关的蛋白，这组蛋白能够通过T细胞介导杀伤造血干/祖细胞或通过造血抑制因子抑制正常造血。而PNH克隆由于GPI锚链蛋白，固能逃避T细胞的杀伤和造血因子的抑制，从而发挥生长优势。 PNH的诊断实验 初筛试验： 血浆游离血红蛋白(FHb) 升高 结合珠蛋白(Hp) 降低 尿Rous试验 阳性 PNH的诊断实验 经典的诊断试验：补体溶血试验。 Ham试验 （阳性率为79%） 特异性高； 糖水试验 （阳性率88%） 特异性低； 蛇毒因子溶血试验 （阳性率为81%）。 PNH的诊断实验 诊断技术进展 流式细胞术检测GPI锚连蛋白缺失细胞 嗜水气单胞菌毒素溶血试验 PIG—A基因突变的检测 Flow Cytometric Analysis Hillmen et al, NEJM, 1995 嗜水气单胞菌毒素溶血试验 原理： HEC毒素能特异地与细胞膜上GPI锚蛋白结合，随后立即聚合成多聚体，插入细胞膜的脂质双层，在膜上形成孔洞使细胞渗透压改变而溶破。含GPI锚链蛋白的红细胞越多，HEC毒素引起的溶血越严重，含GPI锚链蛋白的红细胞越少，则HEC毒素引起的溶血越轻。从而可区分正常人群和GPI锚蛋白缺陷的PNH患者。 方法： · HEC毒素溶血试验微量酶标 板法 · HEC毒素溶血试验比色法 PNH的诊断实验 小结： Ham’s试验等补体溶血试验 经典操作简单但难于标准化 适于基层单位 流式细胞仪检测技术 可靠 HEC毒素溶血试验 临床价值待观察 PIG－A基因突变检测 尚为研究手段 * *