临床遗传 第十六章临床遗传Chapter 16． Clinical Genetics.pdfVIP

第十六章 临床遗传 Chapter 16． Clinical Genetics Clinieal genetics的主要内容: Diagnosis, Therapy, Prevention Basis: medical genetics; pedigree investigation; clinical examination 一、The diagnosis of inheritance disorders 临床诊断: 症状前诊断，产前诊断 临床上常规的诊断技术均能应用(体检、物理诊断、临床检验诊断等) 特殊诊断: 家系调查、分析; 染色体核型分析; 酶及特殊蛋白质的生化分析; DNA诊断。 1、Prenatal diagnosis 产前诊断是遗传病预防的重要手段之一。 * genetic register, * genetic follow-up and * prenatal diagnosis * genetic counseling构成遗传病预防的重要内容。 遗传病的特殊性，治疗的困难，更显预防之重要。 产前诊断的适应范围:见 p.344. ※ The methods of prenatal diagnosis (Slide:自, ⑴羊膜穿刺. 流产率2.5%， 时间:孕16～20周(晚!) p.344 图16-1) 1)核性别及核型分析； 2)酶及蛋白质的量及质的分析 ； 3)α-FP； 4)羊水 细胞DNA分析。 ⑵绒毛取样. 流产率7%，时间:孕7～9周 (Slide:F15-8, p.344 图16-2) 凡羊水(细胞)可作的分析，绒毛细胞均可作。 优点:(与羊膜穿刺比较): 1)时间早、效果好。 2)简便、不需培养、细胞质量好。 3)功能旺盛、生化分析更佳。 ⑶脐带穿刺. 时间:孕18周左右(晚)，流产率1%，取血样分析。 ⑷胎儿镜. 孕15～18周，并发症多，可作宫内治疗。 ⑸超声波. 辅助手段。 ⑹X线照相. 方法缺陷，损害胎儿健康。 2、基因诊断 DNA分析的方法: ⑴Restriction Fragment Length Polymorphism技术(RFLP) 32 14 3 Principle: 由放射性同位素( P、 C、H等)标记致病基因或与其连锁的遗传 标记序列的cDNA作为探针，待测DNA经酶切后与probe杂交，经放射自显影技术 分析检测致病基因或其连锁标记。 Proceeding of RFLP: A、preparation of probe:(合成cDNA并标记同位素) PKU的PAH gene (phenylalanine hydroxylase) 转录 扩增 分离 PAH gene or──→cDNA ＋ plasmid───→E.coli───→plasmid── PAH mRNA R.T. E.CoRI 提取 * plasmid为 ──→Nick translation───→Probe 细菌的环状DNA 32 ( P-dcTP labelling) 能自主复制,借助细菌 B、Hybridization 扩增. 分离提取待测DNA ↓ 酶切 碱处理 （升温时DNA变性） Genomy──→凝胶──→annealling──→Southern blotting＋probe DNA 电泳 （降温） (硝酸纤维薄膜) ──→hy