第五章 发酵工艺控制5.ppt

第五节 溶氧的影响及其控制 一、溶氧的影响 溶氧是需氧发酵控制的最重要参数之一。 溶氧的大小对菌体生长和产物的性质及产量都会产生不同的影响； 谷氨酸发酵，供氧不足时，谷氨酸积累会明显降低，产生乳酸和琥珀酸. 但是，需氧发酵亦不是溶氧愈大愈好。溶氧高虽然有利于菌体生长和产物合成，但溶氧过大有时反而抑制产物的形成。 一般各种发酵都有一个最适氧浓度和发酵产物的临界氧浓度； 最适溶氧浓度的大小与菌体和产物合成代谢的特性有关，这是由实验来确定的。 如氨基酸类发酵，分三类: 第一类：谷氨酸,精氨酸和脯氨酸，供氧充足才产最大，供养不足，氨基酸合成会受到强烈抑制。 第二类：异亮氨酸,赖氨酸,和苏氨酸供氧充足可得最高产量.但供氧受限产量受到影响并不明显. 第三类：亮氨酸，缬氨酸，苯丙氨酸仅在供氧受限，细胞呼吸受列抑制时，才能获得最大量的氨基酸 ，供氧充足，产物形成反而受抑制。 二. 发酵过程的溶氧变化： 在固定设备和正常条件下，每种产物发酵的溶氧浓度变化都有自己的规律： 在发酵前中期，产生菌大量繁殖，需氧不断增加，此时的需氧量超过供氧量，使溶氧浓度明显下降，Cl出现一个低谷，同时，产生菌的摄氧率出现一个高峰. 发酵中后期，对于分批发酵来说，溶氧速率变化比较小。因为菌体已繁殖到一定浓度，进入静止期，呼吸强度变化也不大。 如不补加基质，发酵液的摄氧率变化也不大，供氧能力仍保持不变，溶氧浓度变化也不大。 但当外界进行补料（包括碳源、前体、消耗时）则溶氧浓度就会发生改变。 变化的大小和持续时间的长短，随补料时的菌龄，补入物质的种类和 剂量不同而不同。 如补加糖后，发酵液的菌体摄氧率就会增加，经过一段时间后又逐步回升，如继续补糖，又会继续下降，甚至降至临界氧浓度以下，而成为生产的限制因素。 在生产后期，由于菌体衰老，呼吸强度QO2下降,Cl上升,一旦菌体自溶,Cl继续上升. 发酵过程有时出现溶氧异常，常见的是溶氧下降，主要原因 ①好气性杂菌污染 ②菌体代谢发生异常变化，需氧要求增加使 CL 下降 ③设备工艺控制故障:N下降导致CL下降. 三.溶氧浓度的控制： 从供氧和需氧两方面着手： 供氧方面：主要是设法提高（C*-CL）和Klα,如调节搅拌转速或通气速率来控制供氧,但供氧量大小，还必须与需氧量相协调，也就是说要有适当的工艺条件来控制需氧量，使产生菌的生长和产物形成对氧的需求量不超过设备的供氧能力，使产生菌发挥出最大的生产能力。 需氧方面：发酵液的摄氧率是随菌浓增加而按比例增加（R=QO2·X ）但氧的传递速率是随菌浓的增加而减少，（主要是粘度增大N减小） 因此，可以控制菌的比生长过率使溶氧CL比临界值略高一点的水平，达到最适浓度这是控制最适溶氧浓度的重要方法。 最适菌浓既能保证产物的比生产速率维持在最大值，又不会使需氧大于供氧。 控制最适的菌体浓度，可以通过控制基质浓度来实现，利用敏感型的溶氧电极传感器，自动控制补糖速率，可间接控制N和PH。 另外，还可采用调节温度，液化培养基，中间补水、添加表面活性剂等措施来改善溶氧水平。 §8.8 C02对发酵的影响及控制 C02的来源及对发酵的影响 C02是微生物的代谢产物，同时也是某些合成代谢的一种基质，它是细胞代谢的重要指示，溶解在发酵液中的C02对氨基酸,抗生素等发酵具有刺激或抑制作用。 例如环状芽孢杆菌等已经发芽的孢子在开始生长的时候，对C02有特殊需要,C02还是大肠杆菌和链霉菌等突变株的生长因子，菌体有时需要含30%C02的气体才能生长，这种现象被称为C02效应。 通常C02对菌体生长具有抑制作用， 当排气中C02的浓度高于 4%时，微生物的糖代谢和呼和呼吸速率下降。 例如，发酵液中C02的浓度达到1.6×1.0-2 mol，就会严重抑制酵母菌的生长，当进口C02的含量占混合气体的80%时，酵母活力与对照相比降低20%，当C02的分压达到0.08×105Pa时，青霉素比合成速率会降低50%，其菌丝的形态也会随C02含量的不同而异，若C02含量在0-8%，菌丝体主要呈丝状，C02含量上升到15%—22%时,则呈膨胀，C02的分压达到0.08×105Pa时,则出现酵母状膨胀菌丝,同时青霉素合成受阻. 有些发酵需要提供含有一定量的C02的空气才能进行良好的发酵, 如牛链球菌发酵生产多糖,最重要的发酵条件是提供的空气中要含有5%的C02， C02对某些发酵还能产生抑制作用, 如对肌苷,异亮氨酸，谷氨酸.抗生素等的发酵,特别是抗生素发酵中, C02对细胞的作用机制: 1 抑制生长 主要是C02及HCO3-影响细胞膜的结构,他们分别作用于细胞膜的不同位点,溶解于培养液中的C02主要作用于细胞膜的脂质核心部位,HCO3- 则影响细胞膜的膜蛋白. 当细胞的脂质相中C02的浓度达到一