细胞工程第七章植物转化受体系统(2640KB).pptVIP

第三节 植物基因转化受体系统建立中常遇的问题 一、试管苗的玻璃化现象 症状：试管苗生长异常，叶、嫩梢呈透明或半透明的水浸状，植株矮小肿胀，叶片呈浅绿色或黄绿色，叶片增厚而狭长，有时基部较宽，叶片皱缩或纵向卷曲，脆弱易破碎。叶表面缺少角质层和蜡质或蜡质发育不全。茎短、粗、扁平、节间很短或几乎没有节间。 生理上的变化： 结构：茎尖分生细胞较小、结构简单，缺少具正常功能的输导组织，叶片只有海绵组织，气孔的保卫细胞功能失调等。 生理生化：细胞含水过多，还原糖、蔗糖、K2+、Ca2+、Cl–等含量增高，而木质素、叶绿素、蛋白质、Fe3+、Cu2+的含量降低。 解决措施： (1) 利用固体培养基，增加琼脂浓度，造成细胞吸水阻遏； (2) 提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，造成水分胁迫； (3) 改变培养基中一些激素浓度和一些元素的含量； (4) 增加自然光照； (5) 控制温度，适当低温处理； (6 ) 改善培养容器内的通风换气条件。 二、培养物的褐化 褐变机理 ：酶促褐变和非酶促褐变 酶促褐变： PPO 酚类氧化物 醌+水 非酶促聚合 深色物质 毒害 影响因素： （1） 基因型的影响 ：不同种植物、同种植物不同类型、不同品种存在很大差异 ； （2）外植体部位及生理状态的影响：幼龄材料 、早春或秋季取材 ； （3）培养基成分及培养条件的影响 ：低盐 、激素、低pH、低CO2 等； （4）