人乳头瘤病毒反向点杂交检测方法的研究_丁锋.pdfVIP

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2018-04-02 发布于河南
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人乳头瘤病毒反向点杂交检测方法的研究_丁锋

14 2002 10 6 1 2 1 1 (1. 国家计生委科研所遗传室,100081 2. 苏州医学院生物教研室, 215007) : 目的通过检测正常孕妇及胎儿HPV 的染情况, 探索建立一种简便有效的HPV 检测方法方法在以 + + GP5 /6 为引物的人乳头瘤病毒检测方法的基础上, 利用生物素标记引物(bio- GPbt), 进行 GP- PCR, 并用此PCR 产物与特异性内寡核苷酸探针(SIOP) 进行反向点杂交(RDBH) , 从而达到检测HPV 染并对其分型的目的结果 1. 在对119 份样品的检测中,普通2 琼脂糖电泳的阳性率为303 (36/ 119) ,而反向点杂交的阳性率为437 ( 52/ 119) ,两者之间差别有显 2 著性( = 40568, 001 P 005), 说明反向点杂交(RDBH) 在HPV 的检测中有较高的敏性;2. 在用于检测的4 个HPV探针(6B111618) 之间,未发现非特异性的杂交, 说明反向点杂交(RDBH) 在HPV 的检测中也有良好的特异性 : 人乳头瘤病毒(HPV); 检测方法;通用引物聚合酶链反应( GP- PCR) ;反向点杂交(RDBH) [8] (HPV) : , Probe6:5- ATCCGTAACTACATCTTCCACATACACCAA- 3; 1983 Durst. M Probe11:5- ATCTGTGTCTAAATCTGCTACATACACTAA- 3; [1] Probe16:5- GTCATTATGTGCCATATCTACTTCAGA- 3; HPV ,HPV 16 Probe18:5- TGCTTCTACACAGTCTCCTGTACCTGGGCA- 3 70HPV, 30 [2,3] 30 HPV , , (low- risk 5. Taq DNA PCR- Markerh SA- HPV), HPV6113440424344; (high- risk HPV), HRP Promega HPV16183133353945515254565859666970; ( inter- [3- 7] 1. DNA : mediate- risk HPV) ,HPV133032535557616264 [8] [9] DNA Jacobs Ola Forslund GP- PCR(general primersmediated polymerase chain reaction) (re- + + 2. GP5 /6 GP- PCR: verse dot bolt hybridization; RDBH) [10]