单链噬菌体载体及噬菌粒载体-资料.DOC

第八讲 单链噬菌体载体及噬菌粒载体 吴 乃 虎 中国科学院遗传与发育生物学研究所 第八讲 单链噬菌体载体及噬菌粒载体 一、单链噬菌体的一般生物学 单链噬菌体的优越性 M13噬菌体的生物学特性 二、M13克隆体系 M13克隆体系 M13克隆体系(-半乳糖苷酶的显色反应原理 M13载体系列的发展 M13载体系列的优点 三、噬菌体展示载体 噬菌体展示载体的构建原理 噬菌体展示载体 噬菌体表面展示文库 应用噬菌体展示载体分离有关蛋白质的实例 四、噬菌粒载体 M13噬菌体载体克隆的若干难点 噬菌粒 若干常用的噬菌粒载体 pBluescript噬菌粒载体 pUC118和pUC119噬菌粒载体 第八讲 单链噬菌体载体 一、单链噬菌体一般生物学 大肠杆菌丝状单链DNA噬菌体有M13噬菌体、f1噬菌体及fd噬菌体，它们均含有分子量约为6400个核苷酸的单链闭环DNA分子。 1．单链DNA phage的优越性 具有双链的复制型DNA(RF DNA)，可如质粒质粒一样进行遗传操作；RF DNA：Replication Form DNA。 RF DNA和ssDNA均可感染感受态的寄主细胞——形成phaque或colony。 不受包装的限制。因为单链DNA phage的大小是受其DNA多寡制约的。 可容易地测出外源DNA的插入取向。 可产生大量的含有外源DNA的单链DNA分子，这种单链DNA