肿瘤细胞凋亡放射性探针研究进展一总结概括.pptVIP

肿瘤细胞凋亡 放射性探针研究进展 复旦大学附属肿瘤医院核医学科 细胞凋亡的意义 细胞凋亡是在生理或病理状态下,经过一系列基因调控而发生的细胞程序性死亡。细胞凋亡与多种疾病的发生有关,并在疾病的早期诊断、治疗监测和预后中有着重要的作用。细胞凋亡异常在肿瘤发生、发展过程中起重要作用,并影响肿瘤转移及预后。许多化疗药物及放射治疗就是通过使靶细胞发生凋亡而发挥作用。 细胞凋亡的途径 死亡受体途径(外源性途径) 死亡受体是细胞膜上的一种能与相应配体特异性结合的受体,能够通过一系列基因调控启动细胞凋亡程序,最终导致细胞死亡。死亡受体与其配体结合后通过其它多种分子的共同作用相继激活一系列caspases。 线粒体途径(内源性途径) 在凋亡诱导因素的作用下,细胞色素C等物质被从线粒体释放到胞浆中,在相关因子协同下,相继激活各种caspase。 Caspases:半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cystein aspartic cidspecific proteases) 。8、 9是 “启动者”, 3、 6和7是“执行者” PS:磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine) 凋亡的早期特征主要有PS外翻、Caspases激活、线粒体膜电位改变等,各种分子探针均主要针对这些特征。 细胞膜上磷脂分布不对称性 内膜:磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)和磷脂酰乙醇胺 外膜:磷脂酰卵磷酯和鞘磷脂 细胞凋亡时PS分布:内膜 外膜 膜联蛋白(主要代表物是Annexin Ⅴ、Annexin B1等)能和PS特异性结合 Blood,1997;89:1121–32 小动物活体显像方法 From Siemens and Dr. Wu Zhanhong 小动物活体分子影像学方法比较 光电倍增管 晶体 准直孔 小动物PET/CT 介绍 2.5 mm 3.0 mm 1.5 mm 2.0 mm 1.0 1.25 1.5 2.0 2.5 0.8 小动物 PET/CT 高分辨、高灵敏 方法 优点 缺点 形态学观察 光学显微镜观察 简便可行 缺乏特征性，主观性较强，重复性差 视频时差显微技术 动态观察，可判定 不能用于病理组织 培养中的凋亡细胞 电子显微镜观察 检查凋亡小体的“金标准” 不能定量分析，样品制作过程 较复杂，费用昂贵 细胞化学测定 流式细胞仪定量分析 适于大批量、定量检测 易漏检、错检 酶联免疫吸附法核小体测定 灵敏度高 不能精确定量 DNA 琼脂凝胶电泳法 特异性“阶梯( ladder)小带” 灵敏度低,半定量，不能组织原位检测 DNA 裂解的原位检测 用于原位标记, 可用于病理 非特异性, 易受坏死细胞干扰 组织; 进行定量分析; 灵敏度较高 活体分子功能成像 核素示踪技术 早期、无创、高灵敏、可定量