浙江大学生青年物化学与分子生物学笔记9_蛋白质理化性质与分离纯化.pptVIP

浙江大学生青年物化学与分子生物学笔记9_蛋白质理化性质与分离纯化.ppt

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蛋白质的理化性质 蛋白质溶液是一种胶体溶液; 特定的空间构象,分子量一定 分子筛层析; 在大部分pH条件下,蛋白质分子同时存在两种电荷 等电点沉淀,盐溶,盐析,电泳,离子交换层析等; 一般而言,蛋白质分子上同时存在疏水和亲水区域 有机溶剂沉淀,疏水层析; 蛋白质的理化性质 疏水区域 蛋白质分子上的电荷与疏水区 蛋白质分子上的电荷与疏水区 蛋白质在等电点的溶解度最小 蛋白质在等电点的溶解度最小 蛋白质的盐析 硫酸铵对马血红蛋白的溶解度的影响 离子强度 盐 析 盐溶 蛋白质的盐析 O’Farrell的蛋白质双向电泳 银染结果 考马斯亮染色为蓝色 O’Farrell的蛋白质双向电泳 □□□□■ □□□□□ □□□□■ ■□□□□ □□□■■ ■■□□□ ↓ □□□□□■■■■■■■■■ ■■■■■ □□□□■ □□□□□ □□□□■ ■□□□□ □□□■■ ■■□□□ ↓ □□□□□■■■■■■■■■ ■■■■■ Martin Synge的逆流分配模型 K=1/3 K=2/3 逆流分配模型 理论塔板数决定层析效果 检测器应答 好柱子 差柱子 理论塔板决定层析效果 蛋白质分离纯化中应用的层析 分子筛层析 离子交换层析 亲和层析 疏水/反相层析 物理吸附层析 层析的种类 分子筛层析的工作原理 也叫凝胶过滤层析 分子筛层析的工作原理 离子交换层析原理 离子交换层析的原理 离子交换层析的洗脱过程示意 离子交换层析的洗脱 反相层析中的离子配对试剂的作用 反相层析中的离子配对试剂的作用 HPLC层析系统 泵的结构 HPLC层析系统 填充物的多孔化可以减少层析压 多孔填充物 灌注层析示意 灌注层析示意

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