采用蛋白质沉淀与固相萃取对人血浆中的花青素苷代谢物-Agilent.PDFVIP

采用蛋白质沉淀与固相萃取对 人血浆中的花青素苷代谢物进行 UHPLC-MS/MS 三重四极杆 分析以确定食物中的摄取量 应用简报 食品 作者 摘要 Aman Sandhu1、Indika Edirisinghe1、 事实表明，生物样品的基质效应是造成液质联用(LC/MS) 方法的不稳定与不准确性的原 Britt Burton-Freeman1,2 以及 因。在本研究中，我们开发出了一种用于分析人血浆中花青素苷代谢物的方法。此外， erry Zweigenbaum3 我们通过提取人血浆中五种不同花青素苷代谢物比较了蛋白质沉淀 (PPT) 与固相萃取 这两种不同的样品前处理技术。血液样品采集自饮用草莓饮料 （ 冷冻干燥草莓 1营养学研究中心，食品安全与健康研究 (SPE) 40 g 粉） 、 及 小时后的健康女性志愿者 （年龄 岁）。采用 方法时，在血浆 0 2 3 20 - 35 PPT 所，伊利诺理工学院，美国伊利诺伊州 (500 µL) 中加入酸化乙腈(1.5 mL) ，然后涡旋并离心。收集上清液并用氮气吹干，以待进 2营养学系 行三重四极杆液质联用分析。采用SPE 技术时，先将稀释后的血浆样品加载至SPE 管 加利福尼亚大学戴维斯分校 （ ， ）中，然后用水冲洗，最后收集酸化甲醇的洗脱液。将 Agilent Bond Elut Plexa 3 mL 美国加利福尼亚州 收集的洗脱液在氮气下吹干，以待进行三重四极杆液质联用分析。采用三重四极杆液质 3 联用系统对花青素苷类 代谢物 （矢车菊素 葡萄糖苷 、矢车菊素 芸香糖苷 安捷伦科技有限公司 / -3- (C3G) -3- 、天竺葵素 葡萄糖苷 、天竺葵素 芸香糖苷 及天竺葵素葡糖苷酸 2850 Centerville Road (C3R) -3- (P3G) -3- (P3R) Wilmington, DE 19808 (PG)）进行鉴定与定量分析。 在样品前处理流程后加入与基质匹配的标准品，用此进行分析， 浆果中的花青素苷类对健康的益处。研究人员在方法开发中面临 这些代谢物可获得出色的线性和检测限。在饮用后 小时可观察 的主要挑战是这些化合物在血液中含量极低，而且它们对 较 2 pH 到花青素苷代谢物达到浓度峰值。与 PPT 的样品相比，SPE 的样 为敏感，在酸性条件下较稳定。因此，需要采用有效的提取技术 品中 和 含量明显更高 。然而， 、 和 来提取血浆中的花青素苷代谢物。蛋白质沉淀 因其低廉的 P3G PG (p 0.05) C3G C3R