吉林省长春汽车经济技术开发区第一中学2018届高三上生物早基础知识记忆清单14.docVIP

高三上学期生物学科早基础知识记忆清单（14） 整理人：杨启 2018年1月4日 （一）培养基的基本知识 1．培养基的营养成分 营养物质 定义[来源:Zxxk.Com][来源:学科网ZXXK][来源:学+科+网] 项目 概念 常用方法 应用范围 消毒 使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体等有害的微生物(不包括孢子和芽孢) 巴氏消毒法：70～75℃水中煮30min或在80℃水中煮15min 一些不耐高温的物体如牛奶 煮沸消毒法：在100℃水浴中煮沸5～6 min 一般物品 化学药剂消毒法：用乙醇、氯气、漂白粉、KMnO4等药剂来杀死或抑制细菌生长或繁殖 可用来对环境、双手和衣物等消毒 紫外线消毒法：30W紫外灯照射30min 接种室 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法：酒精灯火焰 接种工具如接种环、接种针等 干热灭菌法：在160～170℃加热1～2h 如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具 高压蒸汽灭菌：压力为100 kPa，温度为12l℃的条件下，维持15～30 min 培养基及容器的灭菌 注意： （三）微生物的纯化培养技术 1．常用细菌培养基——蛋白胨培养基配制流程： 2．纯化大肠杆菌 Ⅰ．原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 Ⅱ．微生物接种方法： (1)平板划线法：平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如图) (2)稀释涂布平板法：10倍系列稀释操作 3．菌种的保存 ①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 微生物的实验室培养 计算 称量 溶化 灭菌 注意：据配方计算配制一定体积培养基时各成分的用量 注意： ①倒平板时，烧杯口要通过酒精灯火焰灭菌。 ②平板冷凝后要将平板倒置，以确保拿放方便，同时避免水分蒸发，以利微生物生长，也可防止皿盖上凝结的水滴滴入培养基，影响pH；其次防止细菌透过皿底、皿盖的缝隙，落在培养基上。 ③倒平板时，不能将培养基溅在皿底与皿盖之间，以防止杂菌滋生，污染培养基 （调PH） 倒平板 注意： ①牛肉膏较粘稠，应玻棒挑取，在称量纸上称量 ②牛肉膏蛋白胨易吸潮，动作要迅速 注意： ①溶化琼脂时要控制火力的大小并不断搅拌，以免培养基溢出或烧焦； ②加热过程中部分水分蒸发，待琼脂完全溶化后应补加蒸馏水，以保持溶液的浓度 注意： 由于不同微生物适宜的pH不同，因此在熔化后，必须用NaOH或HCl来调节pH 装瓶 注意：分装至试管时培养基的高度不要超过试管高度的1/5 注意： ①可用高压蒸汽灭菌法 ②用干热灭菌法时温度160～170℃ (不能超过180℃，否则易引起报纸等燃烧) ③一般是培养基先灭菌再倒平板，也可先倒平板,再灭菌