浙江省杭州市塘栖中学2018届高三生物二轮复习课件：基因工程.ppt

基因工程 基因工程定义 狭义的遗传工程，将某种生物的基因提取出来，导入到另一生物的细胞中，再培育出生物体，使该基因在受体细胞中表达，从而达到定向改变生物性状的目的。 又叫基因拼接技术、DNA重组技术 DNA分子的双螺旋结构 遗传信息传递方式-------中心法则 基因工程原理 变异原理： 外源基因重组 具体的主要原理： （1）基因是控制生物性状的基本单位 （2）所有生物共用同一套遗传密码，且信息传递都遵循中心法则。 基因工程的工具1 ——限制性核酸内切酶（基因剪刀） 基因工程的工具1 ——限制性核酸内切酶（基因剪刀） 定义：能够识别和切割DNA分子的特定核苷酸序列 场所：微生物，如原核细胞细菌 作用：断裂特定部位的磷酸二酯键 基因工程的工具2 ——DNA连接酶（基因针线） 定义：将具相同黏性末端(末端碱基互补)的DNA片段连接在一起的酶。 场所：微生物 作用：形成磷酸二酯键.构建重组DNA分子 基因工程的工具3 ——质粒（运载体） 定义：能够自主复制的双链小型环状DNA分子。 场所：主要在细菌中（酵母菌） 作用：将外源基因导入受体细胞 具备条件： 聚合酶链式反应（PCR）扩增 定义：一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和４种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应 。 用途：在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段（目的基金、外源基因）。 受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞 加大受体细胞大肠杆菌细胞壁的方法：氯化钙 导入方法： ⑴显微注射法---动物细胞 ⑵生物转染（农杆菌）--植物细胞 基因工程的应用 基因工程与遗传育种 基因工程与疾病治疗 基因工程与生态环境保护 基因工程与遗传育种 转基因植物 基因工程与遗传育种 转基因动物 基因工程与遗传育种 转基因微生物 基因工程与疾病治疗 基因工程药物 基因工程与疾病治疗 基因治疗：向目标细胞（有基因缺陷的细胞）引入正常功能的基因。 基因工程与生态环境保护 超级细菌 * * 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) ① ② ②为磷酸二酯键 ① ④ ② ③ ⑤ 复制 复制 基因工程的工具2 ——DNA连接酶（基因针线） 基因工程的工具3 ——质粒（运载体） G A A T T C C T T A A G C T T A A G A A T T C G 粘性末端 2、基因工程的 “ ” C T T A A G A A T T C G DNA连接酶 A A T T C G a、能够在宿主细胞中复制 并稳定地保存 b、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 c、具有标记基因，便于筛选 某些病毒 　基因工程操作的基本步骤 １、获得目的基因 2、形成重组DNA分子 3、将重组DNA导入受体细胞 4、筛选含目的基因的受体细胞 5、目的基因的表达 　用限制酶切断成许多片段 （1）直接分离基因 基因文库 找到目的基因 １、获得目的基因 （２）人工合成基因法 DNA合成仪 　　　①逆转录法：  ②直接化学合成法： 蛋白质的氨基酸顺序 mRNA核苷酸顺序 基因DNA的脱氧核苷酸顺序 直接合成相应的基因。 逆转录酶 mRNA DNA(基因) 2、形成重组DNA分子 重组质粒（重组DNA） 限制性核酸内切酶 质粒 目的基因 DNA连接酶 3、将重组DNA导入受体细胞 导入 扩增 4、筛选含目的基因的受体细胞—质粒上的标记基因 重组质粒 抗青霉素基因 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 5、目的基因的表达 (1)单细胞生物 5、目的基因的表达 （2）多细胞细胞生物 　　胰岛素是治疗糖尿病的特效药，长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　　干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”！过去从人血中提取，300L血才提取1mg！其“珍贵”程度自不用多说。