β-谷甾醇对t47d细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨＊.pdf

2015　第十七卷　第二期　★Vol.17 No.2 β - 谷甾醇对 T47D 细胞增殖和细胞周期的影响 及作用机制探讨＊ 1 1＊＊ 1 2 1 1 1 1 陶仕英 ，牛建昭 ，王继峰 ，郝庆秀 ，赵丕文 ，杨美娟 ，张丽娟 ，冒湘琳 （1.…北京中医药大学基础医学院　北京　100029；2.中国中医科学院中药研究所　北京　100700） β 摘　要 ：目的：观察 -谷甾醇（BSS）对雌激素受体（ER）阳性人乳腺癌T47D细胞的作用，并进一步 探讨其可能的作用机制。方法：以ER拮抗剂ICI182…780为工具药，采用MTT细胞增殖实验观察不同浓 度BSS对T47D细胞增殖的影响；利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响；利用Western-blot 和Real-time…PCR技术检测其对细胞周期蛋白D1（Cyclin…D1）蛋白及mRNA表达的影响。结果：高浓 度BSS抑制T47D细胞增殖，使细胞分裂增殖指数降低，且ICI182…780不能完全拮抗其对T47D细胞的 增殖抑制作用；低浓度BSS可促进T47D细胞增殖，提高细胞分裂增殖指数，且ICI182…780可完全拮抗其 促增殖作用。Western-blot及Real-time…PCR结果显示：低浓度BSS可诱导T47D细胞Cyclin…D1蛋白 和mRNA表达，并且ICI182…780能够抑制此诱导作用。结论：BSS通过ER介导调节Cyclin…D1蛋白与 mRNA水平的表达，从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期，发挥植物雌激素样作用。 β 关键词 ：-谷甾醇　T47D　细胞周期蛋白D1　细胞增殖　细胞周期　植物雌激素 doi ：10.11842/wst.2015.02.012　　中图分类号：R285.5　　文献标识码：A　 β - 谷 甾 醇（β -sitosterol ，BSS ）是 植 物 固 醇 的 胞株 MDA-MB-231BSS 通过诱导凋亡抑制其增殖； 一种，广泛存在于植物的种子和果实中。它可以降 对 于 ER （+ ）乳 腺 癌 细 胞 株 MCF-7BSS 则 有 促 进 低饮食中胆固醇的吸收，因此长期以来研究者们主 增殖作用，但对其发挥促增殖的靶点和途径以及影 要研究其对心血管疾 病的保护 作用[1 ，2] 。近年来， 响增殖效应的基因表达情况尚不明确。本实验从此 随着研究的不断深入，BSS 的抗肿瘤作用已成为研 方面展开研究，通过 BSS 对体外培养的 ER 阳性人 究热点。体外研究发现 BSS 可以抑制多种肿瘤细 乳腺癌细胞系 T47D 细胞的 MTT 增殖实验、细胞周 胞的增殖，如结肠癌细胞株 HT-29 、前列腺癌细胞 期 的 影 响 以 及 ER 完 全 拮 抗 剂 ICI182 780 对 细 胞 株 LNCaP[3 ，4] 。目前虽然对 BSS 的抗肿瘤研究多有 增殖的干预作用，并进一步从分子水平观察 BSS 对 报道，但在对乳腺癌细胞株的研究中，不同的研究 ER 下游基因 Cyclin D1 表达的影响，为揭示其发挥 者[5-7] 应用不同剂量对不同 ER 状态的乳腺癌细胞 植物雌激素样活性及作用机制提供依据。 株进行干预，结果有不同的研究发现：对于及雌激 1　材料 素 受 体（Estrogen Receptor ，ER ）（- ）的 乳 腺 癌 细 1.1　药品　 　　　收稿日期：2014-02-25 BSS（货号：110851）购自中国食品药品检定研 　　　修回日期：2015-01-19 ＊ 国家自然科学基金委面上项目）：基于 PI3K/AKT 信号通路探讨二仙汤治疗化疗损伤性卵巢早衰的作用机理，负责人：牛建昭；教育 　　 部国家外专局高等学科创新引智