实验6、-琼脂糖凝胶电泳.pptVIP

实验六 DNA的琼脂糖凝胶电泳;一、实验目的 ;二、实验原理 ;三、材料与仪器;3、0.05%溴酚蓝-50%甘油溶液：取一定量的0.1%溴酚蓝水溶液，与等体积甘油混合而成。 4、0.5ug/ml溴化乙啶染色液，称取5mg溴乙啶，用无离子水溶解，定容至100ml。从中取1ml，用无离子水稀释，定容至100ml。（有毒，戴手套，在通风柜内进行。） 5、DNA模板：为实验五：质粒小量提取时每组的实验结果。;不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围;1、水平板型电泳槽 2、直流稳压电泳仪 3、微波炉 4、微量移液枪 5、254nm波长紫外分析仪;电泳仪;四、操作方法 ;凝胶板的制备 1. 在电泳槽内插入梳子，距底边保持0.5-1mm的间隙。 2. 待琼脂糖冷至65℃左右，取25mL小心地倒入凝胶槽内，使凝胶缓慢地展开直至在托盘表面形成一层约3mm厚均匀胶层。 3. 液面内不存有气泡，室温下静置0.5－lh。; 4.待凝固完全后，双手均匀用力轻轻拔出样品槽模板（注意勿碰凝胶），则在胶板上形成相互隔开的样品孔。 ; 5.将凝胶连同电泳槽放在平台上。用缓冲液先填满加样槽，防止槽内窝存气泡。接着再倒人大量pH8.3 Tris-硼酸-EDTA缓冲液（TAE缓冲液），直至浸没过凝胶面2－3mm。;加样 1、将DNA