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金属β-内酰胺酶的研究进展 作者： 指导老师：(安庆师范学院化学化工学院， 安庆，安徽 246011)’-GGAATAGAGTGGCTTAATTCTC；无意义链：5’-GTGATGCGTCYCCAAYTTCACT)，VIM-寡核苷酸引物(有意义链：5’-CAGATTGCCGATGGTGTTTGG； 无 意 义 链： 5’-AGGTGGGCCATTCAGCCAGA)。 脉冲凝胶电泳(PFGE)的方法可进行不同种酶的同源性研究，也可进行流行病学的研究。首先要将研究菌株的基因组DNAs在琼脂糖中准备，并用溶菌酶和链霉蛋白酶K按照试剂盒上的说明进行处理。使用12．5U的限制性核酸内切酶SpeI消化DNA，产生的DNA片段再使用1％的琼脂糖凝胶进行分离，用Tris-硼酸-EDTA缓冲液，14℃，Bio-Rad公司脉冲电泳装置，以6．0V／cm、19．7h、120。角位置，转换时间波动于5．3～34．9s[13]。 6展望 金属酶由于其独特的作用机制，使其几乎能水解现有的各类β-内酰胺抗生素，而整合子介导的金属酶的存在，提示今后几年内，金属酶可能快速传播，同时碳青霉烯的使用量增加，将会给金属酶提供选择压力，使沉默金属酶基因激活而表达，如在2010出现的超级细菌NDM-1。目前全球已经有好多研究人员加入了“抗击超级细菌”的战斗中，从各个方面着手研究金属酶。在研究的过程中，也取得了一些进步。除了传统的方法外，还使用了计算机进行模拟作用机制，进化预测。 我们需要不断改进我们的研究方法，研发出理想的抗生素(不会诱导金属酶产生的)。锌离子虽然可以作为靶标，但也会抑制人体中重要的锌离子酶，所以我们需要寻找更好的靶标。为了尽快阻止MBLs的出现和传播，必须集中各个学科的专家比如基因学，微生物学，生物化学，分子建模，生物信息，以及临床研究，只有这样，只有这样才能打赢这场“抗击超级细菌”战斗。 参考文献 [1]] Lee K，Lee WG，Uh Y，et a1．VIM-and IMP-type metallo-beta-lacta-mase-prouducing Pseudomonas spp.and Acinetobacter spp.in Korean hoepitals[J].Emerging infectious diseases,2003,9(7):868-71. [2] Giske CG，Rylander M，Kronvall G．VIM-4 in a carbapenem-resistant strain of Pseudomonas aeruginosa isolated in Sweden．Antimicmbial agents and chemotherapy，2003，47(9)：3034-5． [3] Rasmussen BA，Bush K．Carbapenem-hydrolyzing beta-lactamases [J]．Antimicrob Agents Chemother，1997，41(2)：223．232． [4] Watanabe M，Iyobe S，Inoue M，et a1．Transferable imipenem resis-tance in Psedomonas aeruglnosa[J]．Antimierob Agents Chemother，1991，35(1)：147—151． [5] 沈定霞，罗燕萍，崔岩，等．分离产金属B一内酰胺酶的铜绿假单胞菌[J]．中华医院感染学杂志，2004，14(I)：86—88． [6] Rasmussen BA，Bush K．Carbapenem-hydrolyzing β-laetmaases[J]．Antimierob Agents Chemother，1997，41(2)：223—232． [7] Lee K，Lim YS，Yong D，et，a1．Evaluation of the Hodge test and the imipenem-EDTA double-disk synergy test for differentiating metallo-beta-lactamase-producing isolates of Pseudomonas spp．and Acinetobacter spp．J Clin Microbiol，2003，41(10)：4623-4629． [8] Yong D，Lee K，Yum JH，eta1．Imipenem-EDTA disk method for differentiation of Metallo-p-lactamase-producing clinical isolates of pseudomonas