基因工程菌糖基转移酶的分离纯化与酶学性质研究-浙江工业大学.pdfVIP

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2018-04-11 发布于天津
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基因工程菌糖基转移酶的分离纯化与酶学性质研究-浙江工业大学.pdf

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基因工程菌糖基转移酶的分离纯化与酶学性质研究-浙江工业大学

DOI:10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2015.02.001 年月发酵科技通讯 20第15期 4 2 第卷第期 44 2 基因工程菌糖基转移酶的分离纯化与酶学性质研究陈小龙连振静范永仙，，浙江工业大学生物与环境工程学院浙江杭州（， 310014 ）摘要将含重组质粒在宿主菌中成功表达以镍柱亲和层析超滤： pET28b-ValG BL21 （DE3 ），、脱盐及真空冷冻干燥结晶获得糖基转移酶并初步研究酶学性质在或下。 10～40 °C pH 5～11 ，该酶还能保持较好的稳定性且最适反应温度及分别为与金属离子， pH 30 °C 8.0。 1 mmol/L 2+ 2+ 2+ 2+对酶反应有着显著的促进作用而 2+ 2+对酶反应有强烈的抑制效果。 Ca 、Mg 、Mn 、Co ， Cu 、Zn 当酶反应进程中酶活达到最大时底物及产物的最适浓度分别为与以底， 8 μmol/L 2 μmol/L 。物井冈羟胺足量为前提双倒数作图法表明为为 A ， KmB 35.275 μmol/L ，Vm 0.153 μmol/(L · 酶对井冈羟胺的亲和力较尿苷二磷酸葡糖（好因此在全细胞酶催化过程中对 mi