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2013-2014动物细胞培养技术预测题 名词解释： 1..细胞培养(cell culture)：用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定的结构和功能特征。 组织培养 (Tissue culture)：从人或动物体内取出组织块（O.5～1立方毫米）或薄片，在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能。 器官培养 (Organ culture)：将活体中整个器官或一部分器官或器官原基取出，在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能。 汇合(confluent)：瓶中培养的细胞相互汇合形成单层。 细胞系(cell line)：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。 有限细胞系:不能继续传代或传代数有限。 连续细胞系：能连续传代 细胞株(cell strain)：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称细胞株。特殊性质标记染色体，病毒的敏感性或抗性，特殊的抗原性。 克隆(clone)：由单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。 体外转化(in vitro transformation)：细胞在体外培养中发生与原细胞遗传性状不同的变化（形态、抗原、增殖），但不一定具有致癌性。 体外恶性转化(in vitro Malignant transformation):细胞在体外培养中获得了致瘤性，当把这种细胞接种于适当的动物，可以产生肿瘤。 集落形成率（Plating Efficiency）：细胞接种到培养器皿内形成集落的细胞所占的百分率。表达时,应附注接种细胞的总数、培养瓶的种类、以及环境条件（培养基，温度，密闭系统还是开放系统）均需说明。如果每个集落均起源于单细胞，则使用克隆形成率（Cloning Efficiency) 。 细胞一代时间（Cell Generation Time):单个细胞两次连续分裂的时间间隔。可借助显微照相技术来确定。 群体倍增时间（Population Doubling Time）：在对数生长期计算细胞增加一倍所需要的时间。平均群体倍增时间通过计算培养结束时或收集培养物时的细胞数与接种时的细胞数的比值推算而得。 再培养（Reculture）：单层细胞不经任何丢失而转移到新鲜培养基的过程。 饱和密度（Saturation Density):特定条件下，培养器皿内所能达到的最高细胞数，细胞达到饱和密度后，细胞群体停止繁殖。贴壁培养：细胞数/cm2 ; 悬浮培养：细胞数/cm3 贴壁率（Seeding Efficiency,Attchment Efficiency):在一定时间内，接种细胞贴附于培养器皿表面的百分率，但应当说明测定时的培养条件。 原代培养(primary culure)：从体内取出细胞、组织或器官，在培养瓶内培养到第一次传代前的第一次培养。 传代(passage)：无论是否稀释，将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养。 细胞周期（cell cycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。 单克隆抗体：由单个B细胞克隆产生的针对单一抗原决定簇的同源抗体 现代组织培养法培养基：淋巴液天然培养基的血清的种类多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） 合成培养基的主要成分无机盐氨基酸维生素碳水化合物分散细胞的方法消化分散法机械分散法 提高原代细胞成活率的方法高密度接种 小器皿接种培养面基质包被 体外培养的细胞的有上皮细胞型（内、外胚层起源）成纤维型细胞型（中胚层间充质起源）游走细胞型（活跃的游走与变形运动）多形细胞型（神经细胞） 培养细胞一代生长过程中要经历几个阶段游离期贴壁期潜伏期对数生长期 停止期（平台期，平顶期） 微生物污染的排除方法细菌污染的处理使用抗生素支原体污染的处理 A 抗生素 B 使用支原体特异性抗血清C 加温处理D、动物体内接种除菌法E、巨噬细胞吞噬法F、血清处理 相差显微镜的主要装置有环状光阑 相板 中心合轴望远镜 荧光显微镜的结构 简答以及论述 1.原代细胞实验取材方法 人体肿瘤标本取材成年鼠标本取材鼠胚组织取材）腹水瘤标本取材人皮肤标本取材细胞周期划分为哪几个时期，其特点是什么？测定方法？ 细胞周期（cell cycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。 间期又分为三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。 G1期（first gap）物质代谢活跃，迅速合