枧木的组织培养研究方案.docVIP

枧木的组织培养研究 系部：食品与生物技术系 专业：生物技术及应用 班级：11吉福思班 学号：1102040202 姓名：张永俊 枧木，属椴树科枧木属，在我国仅分布于广西和云南，又叫铁木，属国家二级保护植物。 枧木天然分布仅限于石灰岩石山地区，非石灰岩石山地区未见分布，常生长在石山的中下部，多见于海拔700米以下，最高可在海拔900米地带；人工种在酸性土壤上的枧木虽可生长，但生长很缓慢，在排水不良和易积水的地方不能生长；其根系十分发达，成长树的根伸展半径可达15米，远超出于树冠幅之外。枧木叶嫩时两面有粘质，聚伞花序，花单性，白色，雌雄异株，亦有雌雄同株的。其果长圆形，有5纵翅。枧木为热带偏阳性树种，在全光照下生长发育良好，但在幼树前期需在庇荫下生长。枧木纹理交错，结构细致且均匀，材质重且硬，入水即沉，是耐腐蚀耐虫蛀的珍贵硬材，列为特种商品材，是船舶、车辆、建筑、高级家具的优质用材，枧木砧板为出口商品，早为人们所喜用。广西龙州出产的枧木砧板成为广西远销国内外的土特名产。 研究内容：不同培养基对枧木组织快繁时愈伤组织诱导影响的研究 一、材料 实验用的枧木外植体采自广西职业技术学院第一食堂旁的枧木树上。 二、培养条件 在无菌室内进行培养,培养温度控制在(25± 2)℃,用日光灯照射,光照强度1500～2000lx,每 天光照12h。 三、实验方法 不同基本培养基对枧木愈伤组织诱导的影响 培养基的配制:配制MS、N6、B5、RM4种基本培养基: (1)MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L+PH5.8 (2)N6+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼 脂6g/L+PH5.8 (3)B5+NAA0.5mg/L+6-BA0.5Mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+PH5.8 (4)RM+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6g/L+pH5.8 接种外植体: 接种前，打开超净工作台风机和紫外灯30min, ,将实验将要用到的解剖刀、剪刀、镊子、培养皿等先放入超净工作台灭菌炉里,将枧木外植体用自来水冲洗干净后携带外植体进入无菌室,用75 %的乙醇擦拭超净工作台面、双手及接种工具。先用75%的乙醇对枧木外植体进行表面消毒10~15S,再用0.1%的升汞灭菌8～10min,用无菌水冲洗3次,在灭菌过程中要不断摇晃试管,使其充分灭菌。如此重复进行3次灭菌,将已灭菌的外植体分别接种到4种培养基上,每种接20瓶。 四、结果与分析 分析4种基本培养基对枧木愈伤组织诱导的 影响 接种三周后,观察不同基本培养基对枧木愈伤 组织诱导的结果 观察实验不同培养基上培养出的愈伤组织,其健壮度。例如在N6和B5培养基上培养出的愈伤组织健壮度较好,外观新鲜健壮;在MS培养基上培养出的愈伤组织健壮度一般;在RM 培养基上培养出的愈伤组织健壮度较差,外观发黄。则N6和B5培养基对枧木愈伤组织诱导好。 4种基本培养基对枧木愈伤组织诱导的影响 基本培养 基种类 接种的外植 体数/ 个 诱导出原球茎 外植体数/ 个 污染的外 植体数/ 个 原球茎的 出现率/ % N6 20 B5 20 MS 20 RM 20 由实验得出:其中培养基的诱导效果相对好一些的是哪种。 五、结论 本实验在总结前人研究成果的基础上,研究了不同基本培养基对枧木组培的影响。实验证明:某某培养基在枧木组培中作用最好。