sop-sc-0001组织样本石蜡包埋及石蜡切片制作操作规程.pdfVIP

最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 最佳实践规范及标准操作流程 文件汇编 （第二版） 2010年5月 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 质量管理体系文件 文件名称 组织样本石蜡包埋及石蜡切片制作操作 编号 SOP-SC-006-01 规程 批 准 人 批准日期 实施日期 组织样本石蜡包埋及石蜡切片制作操作规程 1.目的 规范组织样本的采集后进行固定并使用石蜡包埋，以及制作石蜡组织切片的 操作。 2.适用范围 适用于组织样本采集后进行固定、石蜡包埋和制作石蜡组织切片的操作。 3.定义和术语 3.1 组织样本 组织样本是指由捐赠者提供的，专业人员采集的组织，包括肿瘤、病变组织 和其它对照组织（包含近癌组织、癌旁组织、正常组织等）。 3.2 石蜡包埋 石蜡包埋法是将组织块经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面，石蜡 浸透组织内部，整个组织一样硬化，以利于切成薄片。 4.职责 4.1 样本管理员 对切割的组织块进行固定、石蜡包埋和制作石蜡组织切片。 5.设备和器材 5.1 个人防护装备 手套、口罩、实验防护服、护目镜及其它相关防护装备。 5.2 器材 熔蜡箱（或水浴锅）、镊子。 1 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 5.3 设备 通风橱（或脱水机、包埋机）、切片机、展片箱。 5.4 试剂 10%中性福尔马林、80%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、石蜡。 6.主要流程 6.1 样本要求 6.1.1组织样本采集的过程参见《组织样本采集操作规程》中的具体流程。 6.1.2 进行石蜡包埋的组织块体积应不大于 1.5×1×0.5cm，取材后应迅速 置于中性福尔马林中固定。 6.2 组织样本的福尔马林固定 6.2.1 10%中性福尔马林固定液的制备 甲醛（40%） 100ml 无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4.0g 蒸馏水 900ml 6.2.2组织样本浸没在10%中性福尔马林液中固定。 6.2.3 组织样本固定的时间 6-24 小时最佳，能达到很好的细胞学和免疫组 学的保存要求。 6.2.4组织固定完成后需要经过脱水、透明和浸蜡的过程，然后再进行包埋， 常规操作流程如下。如果整个过程使用自动化的脱水机和包埋机来完成，请使用 厂商提供的流程。 6.3 组织块水洗和脱水 6.3.1用流水冲洗固定组织30分钟。 6.3.2在80%乙醇中60分钟。 6.3.3在95%乙醇I中60 分钟。 6.3.4在95%乙醇II中60分钟。 6.3.5在无水乙醇I中30 分钟。 6.3.6在无水乙醇II中30分钟。 6.3.7在无水乙醇III中30分钟。 2 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 6.3.8注意事项： A.未经充分固定的组织不得进行脱水。 B.脱水试剂体积至少是组织块体积的5-10倍