网站大量收购独家精品文档,联系QQ:2885784924

吉林大学生物基础试验教学中心供试品溶液的配制.ppt

吉林大学生物基础试验教学中心供试品溶液的配制.ppt

  1. 1、本文档共11页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
吉林大学生物基础试验教学中心供试品溶液的配制

吉林大学生物基础实验教学中心 高效液相色谱法测定扑热息痛的含量 吉林大学国家级生物实验教学示范中心 1、目的要求 2、实验原理 3、试剂与器材 4、实验步骤 5、注意事项 6、思考题 目的要求 1.掌握用外标法对比法测定药物含量的实验步骤和结果计算方法 2.熟悉高效液相色谱仪的使用方法 实验原理 扑热息痛即对乙酰氨基酚,其稀碱溶液在257 ±1nm波长处有最大吸收,可用于定量测定。由于在其生产过程中,有可能引入对氨基酚等中间体,这些杂质也有紫外吸收。如果用分光光度法测定,杂质会对含量测定的准确性造成干扰。因此,可采用具有分离能力的高效液相色谱法将被测物和杂质分离开测定,则杂质对被测物含量测定的干扰即被消除。 试剂与器材 高效液相色谱仪 色谱柱:ODS柱(150mmх4.6mm,5um) 流动相:甲醇-水(40:60)流速:1.0ml/min 检测波长:257nm SGE 50ul 微量注射器 实验步骤 1、配制对照品溶液 2、样品溶液的配制 3、进样分析 4、记录格式 5、结果计算 标准品溶液的配制: 分别取母液(1mg/ml)5ml,4ml,3ml,2ml,1ml,加入标号5-标号1的100ml容量瓶中,并用去离子水稀释至刻度,摇匀。用注射器吸取标准品1 ml,过0.45um滤膜,滤液转移到1.5mlEP管中,分别标记。用微量注射器进样,记录色谱图的峰面积和出峰时间。 注意! 0.45um滤膜可重复使用,但须反复润洗! 供试品溶液的配制: 精密称取对乙酰氨基酚粉末3mg,置100ml的容量瓶中,加适量去离子水,振摇,60℃水浴水解40min,放冷10min,待基本溶解完全,加去离子水至刻度,摇匀即得。 进样分析 : 用注射器吸取供试品约1ml,经过0.45um滤膜,滤液转移到1.5mlEP管中。用微量注射器吸取EP管中供试品0.1ml ,进样。记录色谱图的峰面积。 供试品浓度的计算 将标1-标5按浓度-峰面积对应关系做标准曲线,将供试品峰面积带入标准曲线求出供试品浓度。 注意事项 1. 此实验过程中应注意进样量的一致,因此,采用注射过量的样品体积,通过进样环(loop)来定量进样。 2.如果出现色谱峰分离不完全的现象,则可以通过调整色谱柱的长度,调整流动相中甲醇和水的比例,以改善分离效果,使杂质峰和样品峰完全分离。 思考题 1.我们欲每次进样20ul,为何却要进样100ul? 为什么测定扑热息痛片剂中的对乙酰氨基酚时需要长时间水解? 请简述高效液相色谱仪的主要结构(图解也可)。 * * -刘宇- 吉林大学生物基础实验教学中心

文档评论(0)

sunshaoying + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档