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赵丹丹 第3章 蛋白质化学 * 2、基本步骤 ① 取材。 ② 组织细胞破碎。主要有机械、物理、化学和酶学4种方法。 ③ 提取。 ④ 分离纯化。 ⑤ 结晶。 补充：保存。冻干粉保存；溶液保存：加入抗冻剂（50%甘油）后-20~-70℃保存。 ⑥ 鉴定、分析。 赵丹丹 第3章 蛋白质化学 * 3、分离纯化的基本方法 （1）根据溶解度不同的分离方法 ① 盐析 ② 等电点沉淀 ③ 有机溶剂分级分离 ④ 温度影响蛋白质溶解 （2）根据电荷不同的分离方法 ① 电泳 ② 离子交换层析 （3）根据相对分子质量不同的分析方法 ① 透析和超滤 ② 密度梯度（区带）离心 ③ 凝胶过滤又称分子筛层析 （4）根据对配体的特异生物学亲和力不同的分离方法 亲和层析 + + + + 赵丹丹 第3章 蛋白质化学 * 电泳（electrophoresis） ① 定义：在外电场作用下，带电颗粒向着与其电性相反的电极移动。 ② 应用:电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核酸、核苷酸等生物分子的分离、制备和分析。 ③分类：经典的自由电泳或称移动界面电泳 区带电泳：在支持物上将混合