10吸光光度法演示教学.ppt

吸光光度法;教学要求;参考书目 武汉大学 分析化学 第三版 高等教育出版社 彭崇慧等 定量分析化学简明教程 第2版 北京大学出版社 高华寿等 化学平衡与滴定分析 高等教育出版社 张锡瑜等 化学分析原理 科学出版社 林邦A著分析化学中的络合作用 戴明译 高等教育出版社 林树昌 胡乃非 分析化学（化学分析部分）高等教育出版社等等; 基于被测物质的分子对光具有选择吸收的特性而建立的分析方法。 包括比色法、可见及紫外分光光度法、红外光谱法等。;第二节 吸光光度分析基本原理;?;2. 吸收光谱产生的原理 * 吸收光谱是物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生的。 * 分为：原子吸收光谱和分子吸收光谱。;分子具有三种不同能级： 电子能级 振动能级 转动能级;(3)物质对光的选择吸收 ?E = E2 - E1= h ? ;* 单色光：具同一波长的光。 * 复合光：由不同波长的光组成的光。 * 紫外光：波长200~400 nm。 * 可见光：人眼能感觉到的光，波长400~750 nm。由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种色光按一定比例混合而成。 * 波段：各种色光的波长范围。 * 互补色光：两种颜色的光按一定比例混合，得到白光，这两种颜色的光称为互补色光。 ;4、物质的颜色;5.光吸收曲线;(a);(3)不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似,λmax不变。;定性分析与定量分析的基础;1)透光度(透光率,透射比)T; 2.朗伯-比耳定律 1760年朗伯(Lambert J H):A∝b 1852年比耳(Beer A):A∝c ; A＝lg（I0/It)= εb c A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的物质的量浓度，单位mol·L－１； ε：摩尔吸收系数，单位L·mol－１·cm－１； ;3、摩尔吸收系数ε;表示吸光光度分析的灵敏度 当仪器的检测极限A=0.001时，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的最低含量，其单位为μg·cm-2， S与ε及吸光物质摩尔质量M的关系为：;5. 吸光度的加和性;例：某有色物质的溶液,每50mL中含有该物质0.1mmol,今用1 cm比色皿,在某波长下测得透射比为10%,则吸光度A值为_______,摩尔吸收系数(?)值为 ______。若浓度增大,则透射比______,吸光度________, 摩尔吸收系数_____________(增大、减小或不变)。;例: 称钢样0.500g，溶解后定容到50mL容量瓶，摇匀，从中取5.00mL到50mL容量瓶定容，用2cm比色皿在λ525nm，ε=2235，测A=0.124，计算Mn的百分含量。(MMn=54.94) ;例:某有色溶液,b= 2.0cm时T=60 % ，若 c增大一倍，T=？，若改用1cm时 T ，A各多少？ ;;A. 光源 要求:光源强, 稳定,连续光谱 氢灯 氘灯 钨灯 汞灯 B.单色器 作用: 将光源发出的复合光分解为单色光;色散元件：棱镜和光栅 棱镜：根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光 玻璃棱镜用于可见光范围 石英棱镜用于紫外和可见光范围 光栅：根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光;C. 吸收池/比色皿 用于盛放试液的容器。 由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃或石英制成的。 可见光区：玻璃吸收池 紫外区： 石英吸收池 使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。;D.检测器 接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。 分类： 光电管 光电倍增管 E.显示装置 作用: 把放大的信号以吸光度A或透射比T的方式显示或记录下来 常用的显示装置: 检流计、微安表、数字显示记录仪 ;2.分光光度计的类型简介 1） 单光束分光光度计：简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 ;2） 双光束分光光度计：自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 ;第四节 光度分析法的设计;一、显色反应 待测物质本身有较深的颜色，直接测定； 待测物质是无色或很浅的颜色，需进行显色反应(主要有氧化还原反应和络合反应两大类) 显色剂;1. 显色反应的选择 A 选择性好，干扰少，或干扰容易消除;灵敏度高