第一章 紫外-可见分光光度法经典案例.pptVIP

第一篇 光学仪器分析技术; 根据物质发射的电磁波或物质与电磁波的相互作用建立起来的分析方法统称为光学分析法 优点：灵敏度高、选择性好、用途广； 一般光学分析方法：折光、旋光、浊度法、圆二色谱法 光谱法：紫外可见、红外、荧光、原子吸收、核磁共振; 第一章 紫外-可见分光光度法 ultraviolet-visible spectrophotometry;远紫外（真空紫外） （10-200nm） *近紫外 （200-400nm） *可见光 （400-760nm） ;紫外－可见分光光度法根据物质分子中价电子对波长为200 ~ 760nm的电磁辐射的吸收特性建立起来的定性、定量和结构分析的方法。属于电子光谱。 特点：规律性强、重现性好、灵敏度高。 10-6 ~ 10-4 g/ml，部分可达 10-7g/ml 应用：①定性 ②定量 ③推断结构;一 紫外-可见分光光度法的基本原理 和概念 二 紫外－可见分光光度计的基本结构 三 应用实例;§1.紫外-可见分光光度法的 基本原理和概念 一、分子吸收光谱电子跃迁类型 二、紫外－可见吸收光谱中的常用术语三、吸收光谱四、Lambert-Beer定律 五、偏离 L-B 定律的因素; 分子吸收光谱的形成 过程：运动的分子外层电子--------吸收外来辐射------产生电子能级跃迁-----分子吸收光谱。 能级组成：除了电子能级(Electron energy level)的跃迁外，分子吸收能量将伴随着分子的振动(Vibration)和转动(Rotation)能级的跃迁！分子的能量变化?E为各种形式能量变化的总和：;分子中的价电子： ?电子、?电子和n电子 轨道：几率分布 成键轨道 ?、 ? ； 反键轨道 ?*、?* 非键轨道 n ;各轨道能级高低顺序：???? n??*??*；;???*跃迁：分子中的成键?电子跃迁到?*反键轨道上去，这是一切饱和有机化合物都可能产生的电子跃迁类型。 n??*跃迁：分子中未成键的n电子激发到?*轨道上去，所有含有杂原子（O、N、S、P、卤素等）的饱和烃衍生物都可发生这种跃迁。 含有???*、n??*跃迁的化合物，如：饱和烷烃、卤代烷烃、醇、醚等是紫外可见吸收光谱测定时的良好溶剂。; ???*跃迁：可以发生在任何具有不饱和键的有机化合物分子中，其最大摩尔吸光系数?max很大。 n??*跃迁：发生在含有杂原子（O、N、S、P、卤素等）的不饱和化合物中，其最大摩尔吸光系数?max 比较小。;二、常用术语; 用不同波长的光依次透过待测物质，并测量物质对不同波长的光的吸收程度（吸光度A或透光率T），以波长为横坐标，吸收强度参数为纵坐标作图，就可以得到该物质在测量波长范围内的吸收曲线。这种曲线体现了物质对不同波长的光的吸收能力，也称为吸收光谱。 ;吸收峰：曲线上吸光度最大的地方，它对应的波长称最大吸收波长（?max） 吸收谷：峰与峰之间吸光度最小的部位，该处的波长称最小吸收波长（?min） 肩峰：在一个吸收峰旁边产生的一个曲折 末端吸收：只在图谱短波端呈现强吸收而不成峰形的部分;**五、朗伯—比尔定律 ;吸光系数 (E) ：;E值及单位与c的单位有关;例：M（氯霉素）=323.15g/mol，质量浓度为  2mg/100ml，l = 1cm，T = 24.3%，求?？;透光率T 与吸光度A 的关系; 样品吸光度 A 与c是成正比，A与c的关系是通过原点的一直线。但事实上，A 与 c 并不总是成正比，即偏离 L-B 定律。这种偏离有化学方面和光学方面的因素。;（一）化学因素： 溶液中溶质可因浓度改变而有离解、缔合、与溶剂间的相互作用等原因而发生偏离Beer定律的现象； ; 1. 非单色光 Beer定律的一个重要前提是入射光是单色光，但事实上用单色器分离出来的光是具有一定波长范围的光。;? 当E1?E2时，则吸光度与浓度是非线性的。二者差别越大， 则偏离L-B越大； ? 当E1E2，测得的吸光度比在“单色光” ?1处测得的低，产生负偏离；反之，当E1E2，则产生正偏离。 这种影响的程度还与两种光的强度比和检测器对两种光灵敏度的差异等因素有关。所以入射光的谱带宽度将严重影响物质的吸光系数值和吸收光谱形状。;分析谱带的选择;2. 杂散光 从单色器得到的单色光中与所需波长相隔较远的光。 3. 散射光与反射光 使透光强度减弱 ，吸光度值偏高。 4. 非平行光 使l 增大影响测量值;;当相对误差 ?c/c 最小时，求得T=0.368 或