第七章 吸光光度法演示教学.pptVIP

第八章 吸光光度法;8.1 吸光光度法的基本原理;8.3 显色反应;8.5 吸光光度法应用简介;8.1 吸光光度法的基本原理;8.1.1 光的基本性质;光的波粒二象性;单色光、复合光、光的互补; 光作用于物质时，物质吸收了可见光，而显示出特征的颜色，这一过程与物质的 性质及光的性质有关。;如测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，可得到一条曲线，称为吸收曲线或吸收光谱 。;(a); 物质的电子结构不同，所能吸收光的波长也不同，这就构成了物质对光的选择吸收基础。;定性分析与定量分析的基础;吸收曲线的讨论：;④不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 与浓度的关系满足朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律，此特性是物质定量分析的依据。 ⑤在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。;吸光光度法的特点;8.1.3 溶液的吸光定律—朗伯-比耳定律;朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律; 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（比色池的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律 其中，A:吸光度，T:透射比，I0:入射光强度，It:透射光强度，K:比例常数，b:比色池厚度，c:溶液浓度;;摩尔吸光系数 e;? =1.1 ?104;对同一种待测物质，不同的方法具有不同的 ? ，表明具有不同的灵敏度。;2、桑德尔指数 S S 值表示： 截面积为1 cm2的液层，在一定波长或波段处测得的吸光度A为0.001时，所含待测物质质量，单位为 ?g ．cm-2。 Sandell 灵敏度与? 的关系:; 吸光光度法是一种适合于微量组分测定的仪器分析法，检测限大多可达10-3 ~10-4 g / L 或 ~?g / mL 数量级。其准确度能满足微量组分测定的要求。 一般相对误差 2~5 %。例如，石灰石中微量铁，含量为 0.067 %，相对误差以 5 %计算，结果为 0.064 ~ 0.070 %，绝对误差为 0.003 %。 与常量分析相比较：铁矿中的铁含量测定，含量为80%，若相对误差以 5 %计算，结果为 84 ~ 76 %，绝对误差为 4 %。;吸光度的加和性;吸光度 与透光率;吸收定律与吸收光谱的关系;;8.2 吸光分析方法;一、目视比色法; 用纯度较??的单色光照射被测溶液，测量其对光的吸收情况，再根据朗伯-比耳定律计算。准确度、灵敏度较目视比色法提高很多；其所用仪器称为分光光度计。;（一）可见分光光度计结构;构成：狭缝、准直镜、棱镜或光栅、会聚透镜。 ;;单波长单光束分光光度计;单波长双光束分光光度计;8.3 显色反应;显色反应;8.3.1 显色剂的选择;8.3.2 显色条件的选择;酸度的影响;一般显色反应的适宜酸度是通过实验确定的。;三、显色时间 实际工作中，作 A ~ t 曲线，寻找适宜 反应时间。 四、温度 五、溶剂 六、干扰物质 干扰物质本身有颜色、与显色剂反应、与被测离子反应、以及本身的沉淀和水解反应等，均会干扰测定。 消除措施：控制酸度、掩蔽、萃取和其他物理分离法，也可选择适当的测定波长。;参比溶液选择; 参比液的选择;8.4 光度测量的条件选择;8.4.1 测量波长的选择;8.4.2 偏离朗伯-比耳定律;?1 + ?2 ;对吸收光谱而言，b 和 c 固定，;二、吸光质点间相互作用引起的偏离;仪器测量误差;为了减少测量误差，控制溶液的吸光度 ;A;8.5 吸光光度法应用;8.5.1 微量组分的测定;8.5.2 示差光度法;示差法提高准确度的实质;课后第4题;课后第8题;例：某酸碱指示剂的酸式(HIn)在610nm处有最大吸收，在450nm处稍有吸收。其碱式(In)在450nm处有最大吸收，在610nm处稍有吸收。今配制该指示剂c=1.2×10-3mol·L-1的溶液，分别在pH1.00和9.00的缓冲溶液中，用1cm比色皿测量吸光度如下： 现有该指示剂的稀溶液，将其pH调至5.00，在相同条件下测得A610=0.700,A450=0.311。求指示剂的Ka。 ;