第二章 酶经典案例.ppt

第二章 酶 enzyme; 一、 酶的概念;2、酶的化学本质—蛋白质（核酸）(填空题) 酶的化学本质都是蛋白质（除有催化活性的RNA之外） 。 绝大多数酶都是蛋白质。 1983年发现某些RNA分子具有催化活性，对有催化活性的RNA称为核酶。;1. 酶具有共同于一般催化剂的特征;;酶促反应的速度比非酶促反应通常要快105~1017 倍;用简单的实验证明酶的催化效率：; 酶催化的专一性(specificity):是指酶对它所催化的反应及其底物具有的严格的选择性。通常一种酶只能催化一种或一类化学反应。; 这种命名法缺乏科学系统性，易产生“一酶多名”或“一名多酶”问题。如分解淀粉的酶，若按这种命名法则有三种名称，如淀粉酶、淀粉水解酶和细菌淀粉酶。 ?; 该命名法规定，每种酶的名称应明确标明底物及所催化反应的特征，即酶的名称应包含两部分：前面为底物，后面为所催化反应的名称。 ; 2. 国际系统命名法; 国际酶学委员会规定，每个酶都有唯一的特定标码。; 国际系统命名法看起来科学而严谨，但使用起来不太方便。 ;五. 酶的分类;分类序号;六.酶的分离与提取;由细胞内产生后分泌到胞外发挥作用的酶，称为细胞外酶。这类酶大部分属于水解酶。 在细胞内合成后并不分泌到细胞外，而在细胞内起催化作用，称为细胞内酶，该类酶在细胞内往往与细胞器结合，不仅有一定的区域性，而且催化的反应具有一定顺序性。; 在提取某一酶时，首先应当根据需要，选择含此酶最丰富的材料。由于从动物内脏或植物果实中提取酶制剂受到原料限制，成本又很大，因此，目前工业上大多采用培养微生物的方法来获得大量的酶制剂。;抽提：破碎细胞，动植物组织一般可用组织捣碎器；或者加石英砂研磨，将材料做成丙酮粉或进行冰冻融解 ；对细菌，常采用加砂或加氧化铝研磨和超声波振荡方法破碎。 大多数酶一般都用缓冲液进行抽提，缓冲液的类型决定于酶的种类和理化特性，抽提液pH最好远离等电点。 ;浓缩：抽提液或发酵液中酶浓度往往很低，必须浓缩富集。常用的浓缩方法有：加中性盐或冷乙醇沉淀后再溶解，胶过滤浓缩以及超过滤浓缩法等。 纯化：纯化过程就是去除???质的过程。原则：一方面是要提高酶的纯度，另一方面却也使酶的总量不可避免有所损失。 ;结晶：浓缩液经过各种方法的纯化，可得到较纯的结晶产品。 ;酶活力(定义):是酶促反应的能力。酶活力大小就是指在一定条件所催化的某一化学反应速度的快慢，即酶催化的反应速度越快，酶活力越高，反之则表示该酶活力低。 ;1、酶促反应速度曲线：以产物浓度对反应时间作图即可。;可见，反应速度只在最初一段时间内保持恒定，随着时间的延长，反应速度逐渐下降。; （1）国际单位 (IU)?; （3） 自定义的活力单位;指每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数;八、酶与疾病的发生： 酶的数量、结构、位置及其调节改变;酶与疾病的诊断：血清酶活性测定;第二节 酶动力学及影响酶反应速度的因素;对于简单的酶反应，当酶浓度和其他条件恒定时：; 为了要解释这一现象，Michaelis Menten 提出了中间络合物学说。该学说必须两个条件： ; 对于单底物、单产物反应，其反应过程需经过中间复合物ES，即 ;刚反应时，若形成中间产物的速度为v1,则 v1?k1 [Et][S] ? k1[（E）-（ES）][S] (1);Michaelis-Menten的三个假设： ;Michaelis-Menten 的三个假设： ;Km—— 米氏常数 由于 Km= (k2+k3)/k1 ， ∴ 为复合常数。 Km是酶的特征常数，经常表示酶与底物的亲和力。 Km值越大，亲和力越小。 (判断题) ;Vt =;二.酶浓度对酶反应速度的影响;三. pH对酶反应速度的影响 ;反应速度和pH的关系见下图：;温度对酶反应速度的影响具有双重性：;五. 激活剂对酶反应速度的影响;抑制作用：有些物质与酶结合后，引起酶的活性中心或必需基团的化学性质发生改变，从而使酶活力降低或丧失。;引起抑制作用的物质称为抑制剂。;第三节 酶作用机理; 1. 酶的组成成分; 2. 酶的聚合状态; 3. 同工酶;乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase，LDH);不同组织中的LDH同工酶的电泳图谱 ;Plant Cell Physiology, 2005. ; 对于适应不同的组织、器官的不同生理需要非常重要；是代谢调节的一种重要方式。;?研究同工酶的意义： ? 是研究代谢调节、个体发育、细胞分化、分子遗传等方面的有力工具。 ? 研究蛋白质结构和功能的好材料。 ? 在临床医学、农业遗传育种、病理分析上都有应用价值