色谱分析研讨法概论.ppt

正相分配色谱：——极性强的组分后出柱 反相分配色谱：——极性强的组分先出柱 洗脱顺序： 相似相溶原理 C t a b C t b a 正相色谱 反相色谱 极性：ab 二、分配色谱法 选择性系数 分离机制： 依据被测组分与离子交换剂交换能力不同而实现分离 三、离子交换色谱法 固定相与流动相： 固定相→离子交换树脂，硅胶键合离子交换剂 被交换基团：－SO3H,－COOH, －NR3+OH- 。 性能指标：交联度、交换容量、粒度等。 流动相→一定pH和离子强度的缓冲溶液 被分离组分→离子型的有机物或无机物 三、离子交换色谱法 KA/B越大，交换能力越大，越易保留，后出柱 洗脱顺序： 影响保留行为的因素 离子电荷数越大，KA/B越大，保留时间越长 交换树脂交联度越大，组分保留时间长 流动相的离子强度提高，组分保留值降低 三、离子交换色谱法 四、空间排阻色谱法 分离机制 渗透系数 利用被测组分分子大小不同、在固定相上选择性渗透实现分离 注：Kp仅取决于待测分子尺寸和凝胶孔径大小，与流动相性质无关 固定相与流动相： 固定相→多孔性凝胶 流动相→水——凝胶过滤色谱 流动相→有机溶剂——凝胶渗透色谱 洗脱顺序： 保留值常用保留体积表示 分子线团尺寸（分子量）大的组分，渗透系数小，保留体积小，先被洗脱出柱。 四、空间排阻色谱法 四种色谱类型的比较 四种色谱的分离机制各不相同，分别形成吸附平衡、分配平衡、离子交换平衡和渗透平衡 K分别为吸附系数，狭义分配系数，选择性系数和渗透系数 分配系数大的组分保留时间长（保留体积大），晚流出色谱柱。 物质对分离的两种情况 C t C t 提高分离度R 增加?tR 减小w 理想的色谱峰为什么是正态分布的？ 为什么峰会变形、展宽？ 如何评价色柱的分离效能？ 组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制； （与分配系数有关） 色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制； （两相中的运动阻力，扩散） 第四节 色谱理论基础 热力学理论： 塔板理论（Plate Theory） 动力学理论： 速率理论（Velocity Theory） 一、塔板理论 塔板理论（plate theory） 第一次平衡称为一个理论塔板 H为理论塔板高度 始于马丁（Martin）和辛格（Synge）提出的塔板模型。 把色谱柱比作一个蒸馏塔，把色谱分离过程比作蒸馏过程。 塔板理论假定： 1）样品和新鲜载气都加在第0号塔板上，且样品的纵向扩散可以忽略。 2）在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； 3）每次分配的分配系数相同； 4）流动相以不连续方式加入。 n0 n1 n2 。 。 。 。 。 。 。 。 nn 3.按色谱过程的分离机制分类 分配色谱法 (patition chromatography) 吸附色谱法 (adsorption chromatography) 离子交换色谱法 (ion exchange chromatography) 空间排阻色谱法 (steric exclusion chromatography) 键合相色谱法 (bonded phase chromatography) 毛细管电色谱（capillary electrochromatography） 二、色谱法分类 4.按使用目的分类 分析用色谱仪 制备用色谱仪 二、色谱法分类 优点：“三高”、“一快”、“一广” 高选择性——可将性质相似的组分分开 高效能——反复多次利用组分性质的差异 产生很好分离效果 高灵敏度——10-11~10-13g，适于痕量分析 分析速度快——几~几十分钟完成分离 一次 可以测多种样品 应用范围广——气体，液体、固体物质 化学衍生化再色谱分离、分析 三、色谱法的特点 缺点： 对未知物分析的定性专属性差 需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS) 三、色谱法的特点 第二节 色谱法的基本原理 实现色谱分析的基本条件 相对运动的两相——流动相、固定相 各组分与固定相的作用存在差异 两个组分被流动相携带移动的速度不同 ——差速迁移，两组分被分离 一、色谱过程 色谱过程是物质分子在相对运动的两相分配“平衡”的过程。 吸附色谱：吸附→ 解吸→再吸附 →再解吸