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课件5-糖组学经典案例.pptx
王玮;1、糖组学(glycomics) 的背景及研究意义;糖链影响糖蛋白的分泌和稳定性; 血清中很多蛋白质式含有以唾液酸残基为末端的N-糖链糖蛋白,称唾液酸糖蛋白,如免疫球蛋白、蛋白质激素,载体蛋白等。;●与细胞粘着有关;●与精卵识别有关;●糖链与酶活性;●糖链与激素活性;类风湿关节炎;糖类;糖蛋白Glycoprotein;一种或多种糖以共价键连接到肽链上的蛋白质。;葡萄糖(Glu)
半乳糖(Gal)
甘露糖(Man)
N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)
岩藻糖(Fuc)
N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)
N-乙酰神经氨酸(NeuAc); 糖蛋白糖链的N-连接型和O-连接型 ;(二)N-连接糖蛋白的糖基化位点为Asn-X-Ser/Thr;(三)N-连接聚糖可分为3型;(四)N-连接寡糖的合成是以长萜醇作为聚糖载体 ;长萜醇-P-P聚糖的合成;N-聚糖的加工过程 ;(五)O-连接糖蛋白;
;二、糖蛋白分子中聚糖的功能;(二)糖蛋白聚糖加工可参与新生肽链折叠;(三)糖蛋白聚糖可参与维系亚基聚合;(五)糖蛋白聚糖具有分子间的识别作用;蛋白聚糖Proteoglycan;蛋白聚糖是一条或多条糖胺聚糖以共价键与核心蛋白形成的大分子糖复合物化合物。;蛋白聚糖的结构;一、糖胺聚糖是含已糖醛酸和已糖胺组成的重复二糖单位;二、核心蛋白均含有结合糖胺聚糖的结构域;大分子聚集型胞外基质蛋白聚糖
小分子富含亮氨酸胞外基质蛋白聚糖
跨膜胞内蛋白聚糖;;三、核心蛋白逐一加上糖基而形成蛋白聚糖;2、糖组学的研究策略;3、糖组学研究技术进展;(1)糖蛋白的提取和分离纯化;●SLAC;(2)糖链的释放;(3)糖链的分离纯化;B、电泳法
硫酸化、唾液酸化的糖链可用电泳法分离纯化。中性糖链通过与硼酸作用形成带电的复合物,也可用电泳分离。电泳技术不仅可以对糖蛋白糖链进行一定的分离纯化,还可以给出其相关的结构信息。荧光辅助糖电泳(FACE) 、毛细管电泳(CE) 等是糖链分离纯化、结构解析的常用工具。
;(4)糖链结构的解析;A、基于DNA测序仪的荧光糖电泳;B、用于糖链结构解析的质谱分析法;C、核磁共振技术(NMR);2)功能糖组学研究技术;(1)糖、凝集素芯片;;(2)杂交糖类/糖蛋白芯片;(3)用于研究蛋白质-糖相互作用的表面质子共振技术;3)生物信息学;Prediction / analysis of glycosylation positions in proteins?;Tools for glycan structure analysis;5、展望;虽然目前还存在诸多的问题,但是糖组学研究这一崭新时代的到来是不可避免的,而且越来越多的科学家正投身到这一领域中。相信随着研究的深入,人们对生命本质的理解将会随之而达到新的高度。;谢谢!
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