探究不同激素浓度配比与烟草叶片愈伤组织诱导的关系-植物生理学.pdfVIP

组织培养报告 探究不同激素浓度配比与烟草叶片愈伤组织诱导的关系 姓 名： 郭 林 学 号： 10121910202 组 员： 覃治祯 日 期：2014 年11 月13 日 目录 摘要2 关键词2 0 背景2 1 材料和方法3 1.1 实验材料3 1.2 组织培养环境3 1.3 试剂和器材3 1.3.1 实验试剂3 1.3.2 实验仪器4 1.4 实验方法4 1.4.1 培养基的配制4 1.4.2 外植体前处理与接种4 1.4.3 观察产生愈伤组织5 1.4.4 愈伤组织的培养5 2 结果5 2.1 诱导率5 2.2 形态学5 3 讨论与分析7 3.1 外植体的选择7 3.2 内源激素对愈伤组织诱导的关系8 3.3 外源激素对愈伤组织诱导的影响9 参考文献10 附录12 1 探究激素浓度配比与烟草叶片愈伤组织诱导的关系 摘要：本实验以MS 培养基为基础培养，分别在MS+6-BA 1 mg/L +NAA 0.2 mg/L 和MS+6-BA0.1mg/L+NAA 0.5mg/L 两种培养基上对烟草叶片进行愈伤组织的诱 导，探究相同烟草叶片不同激素6-BA 和NAA 浓度配比对烟草叶片愈伤组织诱 导的关系。结果表明在MS+6-BA 1 mg/L +NAA 0.2 mg/L 培养基上诱导出的愈伤 组织 更 利于 叶的分化 ，且诱导出的愈伤组织的体积较大， 在 MS+6-BA0.1mg/L+NAA 0.5mg/L 培养基上诱导出的愈伤组织更利于根的诱导， 且诱导出的愈伤组织的体积较小。 关键词：烟草，脱分化，愈伤组织，培养基，激素 0 背景 我国大多数师范院校都普遍开设植物生理学或植物生物技术类实验课程，其 中植物组织培养技术作为一项基础技术成为必修实验。我校植物组织培养实验属 于《植物生理学实验》课的一部分，实验内容以诱导叶片脱分化形成愈伤组织为 主。实验部分仍然按照传统的教学环节进行培养基配制（3 学时）和无菌操作（3 学时），着重实验技术的指导与学习。 根据植物细胞全能性的原理，特别是在生长素和细胞分裂素的作用下，植物 可以脱分化成愈伤组织。烟草（Nicotiana tabacum ），茄科，多年生植物，是重 要的模式生物，因此也被我校选为植物组织培养的材料。众所周知，生长素在植 物体内分布是不均匀的，嫩叶中生长素分布较多，老叶中分布较少，在诱导植物 形成越伤组织的过程中，内源激素在一定程度上也起着重要的调节作用。除此之 外，选取的外源激素的浓度配比不同都会对愈伤组织有一定影响。胡伟、陈豫、 伍洋等人在对不同激素浓度配比对萝卜愈伤组织形成的影响中发现，在以萝卜直 根为实验材料，不同激素 NAA 、2,4-D 、6-BA 浓度配比对萝卜外植体形成愈伤 [1] 组织诱导率和质量有一定的影响。 20 世纪50 年代以来，烟草愈伤组织的诱导 遵循Skoog-MiUer 分化模式：培养基内生长素和细胞分裂素的浓度和比值制约芽 2 和根的分化。这一原则被广泛地应用于植物组织培养实践。细胞分裂素的浓度低， 生长素的浓度高时易形成愈伤组织；反之，细胞分裂素浓度高，生长素的浓度低 时，有利于芽的分化。本课题实验选用烟草叶片，进行愈伤组织的诱导，并观察 其在不同激素浓度的培养基上的诱导情况。 1 材料和方法 1.1 实验材料 烟草（Nicotiana tabacum ）叶片 1.2 组织培养环境 培养条件为28 ℃，暗处理一周后，进行24 小时光照培养。如图1 所示。 图表 1 烟草愈伤组织培养环境 Fig. 1 Tobacco callus cu