艾滋病筛查实验室标准规范操作程序(sop).docVIP

标准操作程序（SOP） 艾滋病筛查实验室 宾县人民医院 艾滋病实验室标准操作程序（SOP） 目　　　录 BXYY_AIDS_SOP001 抽血标准操作程序 BXYY_AIDS_SOP002 酒精棉球的制备 BXYY_AIDS_SOP003 样品接收登记处理程序 BXYY_AIDS_SOP004 检测结果报告程序 BXYY_AIDS_SOP005 HIV抗体筛查检测程序 BXYY_AIDS_SOP006 废弃物处置和实验室消毒程序 BXYY_AIDS_SOP007 检测数据的记录与保存程序 BXYY_AIDS_SOP008 ELISA法HIV抗体检测操作程序（珠海丽珠） BXYY_AIDS_SOP009 仪器保养维护校准程序 BXYY_AIDS_SOP010 微量可调移液器标准操作程序 BXYY_AIDS_SOP011 实验室的消毒和处理程序 BXYY_AIDS_SOP012 实验室质量控制程序 BXYY_AIDS_SOP013 保密程序 BXYY_AIDS_SOP014 实验室意外和事故处理程序 BXYY_AIDS_SOP015 实验室安全防护程序 BXYY_AIDS_SOP016 ELISA法HIV抗体检测操作程序（上海科华） BXYY_AIDS_SOP017 酶标仪标准操作程序（Anthos 2010） BXYY_AIDS_SOP018 自动洗板机标准操作程序（Anthos Fluido） 4.用封片纸覆盖反应板后，置37℃孵育60分钟。 5.取出已孵育完毕的反应板，弃去封片纸，洗涤反应板5次。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序，用步骤1配制的工作浓度洗涤液注满各孔，每次工作浓度洗涤液在反应板微孔中的停留时间为30-60秒，并确保每次吸净无残留，洗完后在干净的吸水纸上拍干。 6.在已加入待测样本和阴性、阳性对照的孔中加入100μl酶结合物。混匀，用封片纸覆盖反应板，置37℃孵育30分钟. 7.洗涤同步骤5。 8.洗涤结束后立即在所有孔内加入显色剂A、显色剂B各50μl，混匀。 9.在微孔振荡器上震荡10秒钟，或手工轻轻震荡10秒钟。 10. 用封片纸覆盖反应板后，置37℃孵育30分钟. 11.在所有孔内加入50μl终止液，震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。 12.在酶标读数仪中，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），以空白对照孔校零，读取每孔OD值（加终止液后，务必在10分钟内读数）。 结果判定 1.抗HIV阳性对照OD值0.8，抗HIV阴性对照OD值0.08。 2.样品的OD值≥Cut off值者为HIV抗体反应阳性。 3.样品的OD值Cut off值者为HIV抗体反应阴性。 4.正常时，阴性对照A值应≤0.12，阳性对照A值应≥O.80，阴性对照值若小于O.08以O.08计算。 5.初次试验阳性者应重新取样进行双孔复试，按全国HIV检测管理规范的要求，须将血样或重新采血送HIV确认实验室做确认试验，确认报告阴性者，血可以发放使用：凡确认实验阳性和可疑者，血不能发放使用，统一送确认实验室处理。 注意事项 1.本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIv初筛实验室。 2.整个HIV榆测必须符合《全困艾滋病枪测工作规范》，严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。 3.H1V-1／HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。 4.样品、酶结合物溶液等应用加液器加注，并经常校对其准确性。 5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。 6.所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 7.微孔板条从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽方可使用；未用完者须放入有干燥剂的密封袋中保存。 8.用于检测的样品应保持新鲜。 9.剩余样品及废弃物应经12l℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.Og/l。次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 10.不同批号的试剂组份不可混用。 11.于2～8℃避光保存，有效期：12个月。  标题：酶标仪标准操作程序 （RT6000） 目的 用于ELISA试验吸光度的测定。 适用范围 波长400～750nm的吸光度测定。 原理 1.酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被检测物的吸光值。光穿过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 2.每一种物质都有其特定波长，此波长下，此物质能够吸收最多能量，如果选择其他波长段，就会造成检测结果不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定波长进行检测，称为检测波长。但是，干涉滤光片的波长公差在±2nm之间，这会在一定程度上造成结果的不准确，因此我们再选择一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照