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全组织神经元高尔基法染色试剂盒产品说明书(中文版).doc
全组织神经元高尔基法染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
全组织神经元高尔基法染色试剂是一种旨在使ligodendrocyte)和其它突起(process)尤其树突(dendrites)形态学的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种新鲜或冰冻脑组织的相关神经细胞检测。广泛用于动物脑神经病理生理解剖学的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
意大利科学家高尔基(Camillo Golgi)于1873年发明了神经细胞黑色反应的浸银染色脑组织经固定银染色保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保证月
用户自备
样本固着处理
常规麻醉动物使用适量的液(Reagent A)灌注处理
即刻小心取出脑组织小心放进到20毫升 固着液(Reagent )里室温下浸泡孵育小时
用无菌手术刀将脑组织切成厘米厚的组织块
即刻用无菌镊子夹起组织块
小心转移到20毫升 氧化液(Reagent )里(20毫升/2块组织块)
室温下浸泡孵育2,避免光照
小心转移到20毫升 营养液(Reagent )里
室温下浸泡孵育48小时,避免光照小心转移到20毫升液(Reagent D)里
室温下浸泡孵育48小时,避免光照(注意:可以孵育1周)
用绵纸吸干组织快
样本染色处理
准备1个6孔细胞培养
放进上述预处理的动物组织样本
小心加入3毫升 清理液(Reagent ),清洗组织样本
室温下孵育2分钟
小心抽去清理液
重复实验步骤3至5一次
加入3毫升 染色液到培养孔里,浸没整个组织
室温下孵育,直至呈现黑色,即刻终止,避免光照
小心抽去 染色液
小心加入3毫升 清理液(Reagent ),清洗组织样本
室温下孵育2分钟
小心抽去清理液
(选择步骤)进行复染操作(建议使用 甲苯酚紫(CRESYL VIOLET)复染试剂盒-80052)
用绵纸吸干组织快
取出组织块,进行缓慢切片,为100微米厚,并铺片在明胶化载玻片上
在一般光学显微镜下观察:神经元、锥体细胞、胶质细胞、少突触胶质细胞(椭圆形如同串珠)和其它突起,呈现黑色(如果复染――细胞核呈现蓝色,胞浆尼氏(体)物质呈现粉红至紫色)
注意事项
本产品为10次操作
操作时,须戴手套
染色液避免光照
建议使用玻璃染色缸
整个操作,在避光状态下进行
染色完成后,铺片须使用明胶化载玻片,否则会掉片
切片建议100至200微米,过厚和过薄不利于检测神经细胞
全组织染色存在其染色不均匀、组织内部染色渗透困难等局限
样品染色后保存,避免光照
本公司提供系列组织细胞神经系统成分染色试剂产品
质量标准
本产品经鉴定性能稳定
本产品经鉴定显色清晰
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