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文献综述
高效液相色谱选择性优化的基本方法和策略
胡育筑
(中国药科大学,南京,210009)
提〔要〕 本文综述了高效液相色谱法方法发展中选择性优化的基本方法和策略,介绍了影响色谱选择
性优化的三个主要方面:即色谱参数的选择、优化指标和实验设计及优化方法,并评述了今后色谱选择性优
化的发展趋势。
自七十年代起,色谱理论、色谱技术和色谱 特别重要。图1中有两个步骤涉及优化:选择性
仪器 〕〔迅猛发展,色谱方法已成为分析化学中 优化和系统优化。本文仅讨论选择性优化。
应用最广泛的分离和分析工具,智能色谱实验室 Masst、?Bemdge?澈和Schoenmakers1〔6
的两个重要组成部分机器人 2〔-〕和专家系 曾系统论述了色谱选择性优化的理论和策略。色
统 3〕的研制引起了许多分析工作者的兴趣。 谱选择性优化的目的是要控制各组分的洗出次
显然色谱技术的成功应用取决于正确的色谱方 序,在可能短的时间内实现各组分的最优分离。
法,图1列出了建立高效液相色谱方法的一般步 色谱选择性优化的过程包括色谱参数和优化指标
骤。既然色谱方法的主要功能是分离,建立色谱 的选择、实验设计及优化。
方法需要决定的分离条件、分离目标和仪器参数
一、色谱参数的选择
等。对这样多变量多目标问题,方法优化显得
影响色谱选择性的实验参数与所选用的色谱
技术有关。以反相离子对色谱法为例,可供选择
的色谱参数有:流动相的有机改良剂浓度、离子
强度、pH值、离子对试剂的浓度和种类等。
一般,这些参数间可能存在交互作用,因此
应当综合考虑各参数的作用。对于多参数的体
系,可应用不完全因子设计方法 14〔,17,选择两
或三个最重要的参数作为待优化的参数。参数取
值的下限和上限的范围称为参数范围。参数范围
过大易导致局部优化,且对实验、仪器等要求较
高,因此一般主张使用尽可能少的参数和窄的参
数范围。
二、优化指标
优化指标是评价色谱分离效果的质量标准,
可分为基本指标和综合指标。基本指标评价色谱
峰的分离,综合指标评价欲分离混合物的全色
谱。表 1列出了最常用的优化指标,包括 6个基
本指标和4个综合指标。显然,综合指标均建立 V 峰谷高度(v=g-f
在基本指标的基础上,且色谱选择性的评价一般 hi峰i的高度
必须使用综合指标。
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