微生物细胞直接计算.doc

生物化学实验报告 院系 湖南化工职业技术学院 班级 化学制药1112班 学号 201103041143 姓名 黎校良 实验名称 微生物细胞直接计数 日期 2012年11月27日 同组者姓名 唐艳君、赵美英 一、目的和要求 1、了解血球读数板的都遭和技术原理及方法。 2、掌握用显微镜直接测量微生物浓度的方法。 二、基本原理 血球计数板的计数室长和宽各1mm，深度为0.1mm，故体积为0.1立方毫米。只要在显微镜下计算出计数室内微生物细胞数量，再按规定方法及计算公式运算后，即可得出实际数值，这种方法无论死活细胞均可计算在内，为了容易计算，需对样品进行适当稀释。 三、仪器、试剂 器材：显微镜，血细胞计数板，滴管，擦镜纸。 试剂：酵母菌悬液，0.1%亚甲蓝染液，生理盐水。 四、实验步骤 1、稀释：取酵母菌悬液一管（约5ml）加生理盐水适当稀释，以每小格菌数可数为宜（5~10个） 2、染色：向菌悬液中加入0.1%亚甲蓝染液0.5ml，摇匀，使酵母菌着色。 3、加样：取干净的血细胞计数板盖上玻片边缘滴一滴，让菌液自行渗入，并充满计数室，注意不要有气泡产生。 4、计数：用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜计数，计算需进行两次，相差不能过大。如果使用16（中）X25（小）计数板，要按对角线方位左上，右上，左下，右下资格中格（即100个方格）的细菌计数，使用为25（中）X 16（小）的计数板，除了取其4个方位外，还需数中央的一个中格（即80个小方格）的菌数。 5、计算：16（中）X 25（小）计数板：菌数1ml：100个小方格内菌数X400X10^4X稀释倍数。 五、原始数据 无 六、数据处理 无 七、思考题 无 八、实验总结 学习了血球读数板的都遭和技术原理及方法，掌握用显微镜直接测量微生物浓度的方法用来计算微生物的个数。 请用小四号字体、1.5倍行距书写实验报告 湖南化工职业技术学院