第九章胚胎克隆及基因工程动物.ppt

第 九 章 胚胎、克隆及基因 工程动物 第九章 教学要求 掌握： 1、胚胎工程技术的概念 2、什么是转基因动物？ 3、什么是克隆动物？ 了解：动物克隆技术的基本环节及其他内容 第一节 胚 胎 工 程 动 物 Animal embryo engineering 一、胚胎工程技术的概念 胚胎工程技术的重点主要是指从雌、雄生殖细胞至囊胚的体外操作技术，包括人工授精、同期发情、超数排卵、胚胎培养、胚胎保存、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、体外授精、显微授精、性别控制、基因转移、胚胎干细胞、细胞核移植、卵母细胞激活与孤雌发育等。 其中实验动物胚胎分割、胚胎嵌合、胚胎干细胞技术研究，近年来进展迅速。 （一）胚胎分割 Embryonic segmentation  用显微术将未着床的早期胚胎一分为二、四或更多，然后分别移植给受体，妊娠产仔。 一枚胚胎可克隆出两个或两个以上的后代。胚胎分割是胚胎移植、核移植等生物工程的基本技术。 2、胚胎分割技术的进展 1968年，Mular等首次将兔的2~8细胞期胚胎一分为二，移植给受体获得成功。 80年代以来，我国科学家利用胚胎分割先后得到小鼠、牛、山羊、家兔、猪同胚双生后代。 目前，已利用胚胎分割技术先后获得小鼠、家兔、山羊、绵羊、猪、牛、马等实验动物和家畜的同卵孪生后代。 （二）胚胎嵌合 Chimeric embryo 胚胎嵌合 主要指将两枚或多枚胚胎细胞聚合共同发育成一个胚胎，称为嵌合体（chimera)。 例如： 同种黑、白鼠胚胎嵌合，生黑白相间的花鼠； 不同属的绵羊和山羊胚胎细胞嵌合，生绵山羊。 二、胚胎工程小鼠育成技术举例 1、嵌合体小鼠 （mouse aggregation chimera) 2、单亲纯合双倍体小鼠（雌核发育技术） 为了得到一个近交系动物，一般要花费数年，甚至毕生的时间。既使对世代周期较短的小鼠，采用最有效的兄妹交配方法，连续交配20代，还需7~8年时间。 如果采用雌核发育技术来育成一个近交系动物，则将大大缩短育种周期，小鼠只需3周，牛也只需几个月。 三、胚胎工程技术的发展 研究胚胎移植的历史已有100多年。最早成功于1890年，即英国剑桥大学Walter Heape进行的兔胚胎移植。 20世纪30年代，胚胎移植逐渐受到畜牧兽医工作者的重视，先后获得绵羊(1934)等多种动物胚胎移植成功。 20世纪70年代以后，由于人们认识到超数排卵与胚胎移植技术在提高优良母畜繁殖力，加快优良品种改良和动物育种步伐中的巨大潜力，胚胎移植开始被应用于生产实践。 1971年，首家商业性胚胎移植公司(Alberta公司)成立，1974年国际胚胎移植协会(IETS)成立。 现在，胚胎移植技术已成为胚胎工程领域的基础技术和手段，而超数排卵和胚胎移植技术已成为快速扩大优秀种公畜和核心群优良母畜的主要手段。 四、胚胎工程技术的应用 可培育含人类细胞成分的猪，供人类器官移植用。 可克服动物种间杂交障碍，创造新物种。 抢救濒临灭绝的珍稀动物。 可成倍地增加胚胎数量，加速发展优良品种。 可培养遗传型相同的实验动物，为生命科学提供理想的研究材料。 第二节转基因动物Transgenic animal 一、什么是转基因动物 转基因动物（transgenic animal) 是指染色体基因组中整合有外源基因，并能表达和稳定遗传的一类动物。 转基因动物培育的基本原理 借助分子生物学和胚胎工程技术， 将特定的外源基因在体外扩增和加工。 导入动物的早期胚胎细胞中，使其整合到动物的染色体上。 将胚胎移植到代乳动物子宫中，发育成携带有外源基因的转基因动物。 世界首只转基因 猴 二、转基因动物技术常用方法 1、显微注射技术（Microinjected） 直接将外源基因导入受精卵 再移植到受体子宫 发育成携带外源基因的转基因动物。 2、反转录病毒载体技术（Retroviral vector technology ) 将插入有外源基因的反转录病毒载体DNA，通过辅助细胞包装成高感染滴度的病毒颗粒 感染桑椹期的胚胎细胞 随后将胚胎导入受体子宫，发育成携带外源基因的子代。 3、胚胎干细胞（ES）技术 (Embryonic stem cell (ES) technology） 将外源基因直接导入胚胎干细胞，经体外培养筛选后，通过显微操作将其注射到囊胚中 再移植到受体子宫，发育成携带外源基因的转基因动物。 三、转基因动物技术的应用 建立人类疾病的各种转基因动物模型，可以极大地促进对人类疾病的病因、发病机制和治疗学的研究。