实验七微生物数量的测定.pptVIP

1. 取清洁无油的血球计数板（在显微镜下检查，如不干净清水冲洗，不可用硬毛刷刷洗），在计数室上面加盖玻片。 2. 取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。 3. 静止5min后，用低倍镜观察并将计数室移至视野中央。 4. 在高倍镜下计数：随机计数五个中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出一大格中的总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。 5. 计算方法： 6. 注意事项：压在方格线上的菌体，以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内；遇到有芽体的酵母时，若芽体超过母体一半以上，就按单个酵母计数。 7. 计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净，并放回盒内。 下次实验：微生物大小的测定 * * 实验七 微生物数量的测定 一、目的要求 1．明确血细胞计数板计数的原理 2．掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。 二、基本原理 微生物个体生长的时间较短，很快进入分裂繁殖阶段，个体生长难以测定。它们的生长一般以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数法、光电比浊法等。 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 三、实验材料 酵母菌液 显微镜、血球计数器 3. 盖玻片等 Thoma血球计数板 A.正面图 B.纵切面图 1.血球计数板 2.盖玻片 3.计数室 16小格 × 25大格计数室 25小格 × 16大格计数室 计数室的两种刻度形式 四、实验步骤 注意事项: 取样时先要摇匀菌液;加样时计数室不可有气泡产生。 B. 调节显微镜光线的强弱适当。 （X1+X2+X3+X4+X5） 5 X 25（或16）X 10 X 1000 x 稀释倍数 酵母菌细胞数/mL= 五、实验报告 1、结果记录： 将计数结果记录下表。A表示五个中方格中的总菌数。B稀释倍数为102。 注:1 mL菌液总数=A/5×25×104×B=5×107×A 五、实验报告 1、思考题： （1）在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ （2）根据你的体会，说明用血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少误差，力求准确？ （3）某单位要求知道一种干酵母粉的活菌存活率，请设计1-2种可行的检测方法。