激光拉曼光谱法方案.ppt

* 1.多谱线输出的激光器（或可调谐的激光器）。 2.试样的浓度必须很低 避免产生热分解作用，通常在10-8 mol·L-1左右。 共振拉曼散射的强度较普通拉曼谱带的强度增加104～106倍，需要的试样浓度很低，故在研究具有发色基团的样品和低浓度的生物样品有很大应用。 测量共振拉曼效应时的注意点： * 2 表面增强拉曼光谱SERS 试样吸附在金属表面上，增103～106 表面与共振联用检测限10－9～1012 mol/L 1.保证使用环境：具备暗室条件；无强震动源、无强电磁干扰；不可受阳光直射。 2.光学器件表面有灰尘，不允许接触擦拭，可用气球小心吹掉。 3.实验结束，首先取出样品，关断电源。 4.注意激光器电源开、关机的顺序正好相反。 表面增强拉曼使用中的注意事项 * 四、 激光拉曼光谱法的应用 （一） 拉曼光谱与红外光谱的比较 * （二）无机体系 优于红外，基于M－Org键的振动 M－O也具有Raman活性 Raman谱证实： V(IV)是VO2＋不是V(OH)22＋ 硼酸离解是B(OH)4-不是H2(BO)3－ Raman光谱可求H2SO4等强酸的解离常数 * （三）有机化合物 与红外互补， Raman适骨架，IR适端基 C=C 1900-1500 vs-m o-w N=N芳取代 1440-1410 m o 振动 σ/cm-1 拉曼强度 红外强度 O-H 3650-3000 w s * （四）在生命科学领域额 1、生物分子的鉴定与结构表征 拉曼光谱技术在测量生物分子时,具有结构信息量大,测量速度快,操作方便等优点,尤其是在测量DNA 水溶液时,几乎不受水的干扰,故在DNA 的研究中非常直接和有效。通过对DNA 分子的拉曼光谱研究,可以从分子水平上了解遗传、代谢、分化及癌变等过程的生命本质。 2、药物与生物分子的作用机理探讨 药物和生物大分子的相互作用机理可通过其拉曼光谱图中新谱带的出现，谱带位移和谱带强度变化等加以研究。 对药物和生物大分子相互作用的研究,有助于加深理解药物与生物大分子 的作用机理、探索新的有效的药物。 实例：抗坏血酸主要是通过OH 的氢键和C2O 基团与DNA的磷酸盐、碱基及脱氧核酸供体原子发生相互作用。 * 3、细胞、组织和器官的活体与体外检测 组织和细胞发生癌变总是从构成它们的分子开始，癌变过程中各种生物分子的构型、构象及各成分的构成比例发生变化。这些早期变化不引起临床症状且常规的临床检测手段往往难以发现，而拉曼光谱可反映分子的精细结构、振转结构，能够从分子水平上检测出这些变化，已成为早期诊断癌症的潜在途径。 组织细胞在发生癌变后氨基酸、脂类、碳水化合物都可能发生变化，可能成为特征拉曼标志光谱。通过正常和癌变组织细胞的拉曼光谱对比分析可以得出癌变组织内生物分子结构及其含量的变化，在分子和细胞水平上来诊断疾病，为癌症的早期诊断及癌变机理的分析提供重要的理论基础。相对于其他方法，拉曼光谱用于医学诊断是一种具有非破坏性、灵敏度高和高度自动化等优点的崭新技术。 * 实例 胃癌组织与胃正常黏膜组织间存在明显差异，正常组织的酰胺Ⅰ振动分裂为1660cm -1 、1640cm -1 两个峰，而癌变组织仍保留单峰特征，并略向高波数位移，这反映出胃黏膜组织发生癌变后蛋白质的种类发生了变化。 更为重要的是，位于1525～1585cm -1 处的特征振动峰的相对强度在癌变组织中明显减弱，此峰应归属于脂类物质中非饱和脂肪酸的C=C伸缩振动，说明组织细胞癌变过程中耗能快，脂类物质难以在组织和细胞内聚集，因而含量降低。 1445cm -1 与1655cm -1 的拉曼光谱强度比能很好的区别肺正常组织与癌组织。 还有关于乳腺癌、皮肤癌、结肠癌、宫颈癌，颅内肿瘤的报道。 * 思考题 什么是Raman散射、Stockes线和反Stockes线？什么是Raman位移？ Raman光谱法与红外谱法相比，在结构分析中的特点是什么？ 通过文献查阅，举出共振拉曼光谱和表面增强拉曼光谱的应用例子。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 激光拉曼光谱法Laser Raman spectroscopy 一、激光拉曼法光谱概述 二、激光拉曼光谱原理 三、激光拉曼光谱仪 四、激光拉曼光谱分析法的应用 * 一、激光拉曼光谱法概述 Rayleigh散射： 弹性碰撞：无能量交换，仅