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第八章基因的表达与调控下-西安电子科技大学生命科学技术学院.ppt
2、蛋白质乙酰化对基因表达的影响 (1)组蛋白的乙酰化与去乙酰化 组蛋白乙酰转移酶(HAT):一类与转录有关,一类与核小体组装及染色质的结构有关 如:TAF II 250,p300/CBP 功能:激活基因转录 组蛋白去乙酰化酶(HDAC): 如 HDAC1和Rpd3 功能:抑制基因转录 +++ +++ DNA结合区 N端酸性区 非乙酰化 乙酰化 p53乙酰化对转录活性的影响 乙酰化使p53的DNA结合区域暴露,增强了DNA结合能力, 从而促进靶基因的转录 C端碱性区 p300/CBP等蛋白复合物 组蛋白乙酰转移酶CBP/p300蛋白 转录共激活子PCAF P300/CBP复合物既 能使组蛋白乙酰化, 也能使p53乙酰化 目录 蛋白质磷酸化 蛋白质乙酰化 激素 热激蛋白 2 激素对靶基因的影响 通过起始基因转录影响靶基因 靶细胞的细胞质受体,和激素形成复合物 经修饰的受体-激素复合物进入细胞核中, 与染色质的特定区域结合,导致基因转录的 起始或关闭 24 激素 激素 受 体 激素 受 体 激素受体蛋白的结构框架 中央DNA结合区:保守性极高 (42%-94%) C端的激素结合区:有15%-57%同源性 N端:保守性小于15% DNA结合区 激素结合区 激素激活受体分子的机制 激素结合位点 COOH 阻遏物 转录激活区 NH2 铰链区 DNA结合区 固醇类激素 阻遏物 有活性的DNA结合区 COOH NH2 激素、受体与顺式作用 元件的结合位点三者缺 一不可 类固醇激素与甲状腺素通过胞内受体调节生理过程 激素-受体作用假说 (1)受体流动假说:激素-受体复合物可在膜内移动并与腺苷酸环化酶结合,激活环化酶,引起后续效应。 (2)中介物假说:激素受体与腺苷酸环化酶之间可能通过 膜脂偶联在一起。证明:去膜脂后激素的信息传递中断 (3)邻位互调假说:腺苷酸环化酶有几种不同立体构象, 激素与GTP协同作用可使这几种构象之间发生互变。 目录 蛋白质磷酸化 蛋白质乙酰化 激素 热激蛋白 2 热休克蛋白诱导的基因表达 应答元件的概念 能与某个(类)专一蛋白因子结合,从而控制 基因特异表达的DNA上游序列 e.g. 热休克应答元件 HSE e.g. 糖皮质应答元件 GRE e.g. 金属应答元件 MRE 热休克蛋白及相关蛋白和DNA 热激蛋白 (heat shock protein, HSP) 生物在最适温度以上,受热诱导合成的蛋白 热激因子(heat shock factor, HSF) 控制热激蛋白表达的转录因子 热激应答元件 (heat shock element,HSE) 能与热激因子结合,控制基因特异表达的DNA 上游序列(-60bp) 热休克蛋白(HSP)诱导的基因表达 P P P P P 热激因子循环 模板DNA 5nGAAnnTTCnnGAAn3 单体HSF 热激温度消失 HSP70 热休克蛋白调节的表达机制 P 磷酸化HSF HSF结合HSE 三体HSF 热激 变性蛋白结合HSP70 产生大量HSP70 HSP70 面积大代表HSF和 38 疏水重复区 HSF1/2 同源区 HSF的结构 DNA结合区 HSF M391K L395P 1-488 1-452 1-428 1-388 1-380 维持单体构象所必需 删除会导致常温下的高亲和力 mRNA结合作用强 37 44 oC HSF的作用机理 常温 热激后 2 3 1 4 DNA结合区 1 2 3 4 1号链与4号链作用 形成单体HSF 内源拉链之间解离 蛋白质伸展成长链 形成三体HSF 小结 蛋白质磷酸化: 信号传递,PKA,PKC, CaM激酶, MAP激酶, 细胞分裂调控 蛋白质乙酰化: p53蛋白乙酰化 激素对基因表达的影响: 激素、受体、激素 应答元件 热激蛋白对基因表达的影响: 热激蛋白HSP, 热激因子HSF, 热激应答元件HSE 40 miRNA与siRNA的联系: 均为Dicer的产物:长度均为22nt左右 5'端是磷酸基
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