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食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则一、2016版总则变更内容1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。2.删除了规范性引用文件。3.修改了实验室基本要求：应具有相应的微生物专业教育或培训经历（如生物学、植物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正确实施检验。①人员修改为检验人员应掌握实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训，如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术规范（2002））。应在检验过程中保持个人整洁与卫生，防止人为污染样品。应在检验过程中遵守相关安全措施的规定，确保自身安全。有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜色视觉障碍）。②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应:第一类：引起人和动物非常严重疾病，国家未发现或已宣布消灭的微生物，如天花病毒。第二类：引起任何动物比较严重疾病，在人和人、人和动物之间传播如霍乱弧菌。病原微生物分类第三类：引起疾病，但对人、动物或者环境不构成严重危害如沙门氏菌、单增李斯特氏菌。第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。一级（BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用范围如大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌等。重要设备是超净工作台，它可以保护样品不受污染。）实验室生物安全级别二级（BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用范围如沙门氏菌、等致病菌。重要设备是II级生物安全柜。）三级（BSL-3）：操作第二类病原微生物四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。紫外线消毒（臭氧）环境：洁净室消毒空间熏蒸（如空间被霉菌污染可用甲醛熏蒸法消毒）消毒剂表面消毒微生物实验湿热灭菌或常用室消毒灭菌方式平皿工器具灭菌和设备消毒高压灭菌干热灭菌（180℃1h或170℃2h）湿热灭菌或高压灭菌培养基和试剂灭菌煮沸灭菌过滤除菌紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。微生物实验室消毒处理方法：最佳杀菌波长：260nm，需定期更换。有效杀菌距离物品：25-60cm空气：＜2m照射时间：灯亮5-7min后开始计算，＞30min（无人条件下打开）适用范围：室内空气、物体表面。注意事项：人员需在关闭紫外灯至少30min后方可入内作业。③检验用品--增加附录A和一次性用品。附录A 微生物实验室常规检验用品和设备高压锅灭菌效果评价方法化学指示剂：即化学指示卡/胶带，使用方便，高压后可立即得知检测结果。生物指示剂：准确性高，高压后需要培养后才得知检测结果。④培养基和试剂质控-GB4789.28-2013。⑤质控菌株-新增实验室分离、鉴定的野生菌株。4.修改了样品采集①采样原则：样品的采集应遵循随机性、代表性的原则；采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。②采样方案：根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的威海程度等确定采样方案。采样方案分为二级好三级采样方案。二级采样方案设有n、c和m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。（其中n表示桶一批次产品应采集的样品件数；c表示最大可允许超出m值得样品数；m表示微生物指标可接受水平限量值(三级采样方案)或最高安全限量值(二级采样方案)；M表示微生物指标的最高安全限量值。）注意事项：按照二级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值大于m值。按照三级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许全部样品中相应微生物指标检验值≤m值；允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值在m值和M值之间；不允许有样品相应微生物指标检验值大于M值。5.修改了检验—“样品检验”6.修改了生物安全和质量控制（优化）7.修改了记录与报告检验过程中应即时、客观地记录观察到的现象、结果和数据等信息。实验室应按照检验方法中规定的要求，准确、客观地报告检验结果。8.修改了检验后样品的处理检验结果报告后，被检样品方能处理；检出致病菌的样品要经过无害化处理；检验结果报告后，剩余样品和同批产品不进行微生物项目的复检。二、2016版总则具体要求各种微生物危害分类采样分级危害程度微生物学指标三级食品保质期菌落总数、霉菌和酵母间接指示菌大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌