食品中常检病原微生物的检验技术ppt课件.pptVIP

1、志贺菌属分几个群，各群有多少个血清型？ 2、大肠埃希菌在SS、KI等培养基上的生长情况如何？ 3、简述大肠埃希菌的检验程序？ 思考题 注意事项 克氏铁琼脂与三糖铁琼脂的主要区别在于后者加蔗糖可以排除一些发酵蔗糖的非致病性肠道杆菌科细菌，两者主要用于初步鉴别肠杆菌科的细菌。 * 第五节、肉毒梭状芽孢杆菌及肉毒毒素检验 学习目的与要求 1. 掌握肉毒梭状芽孢杆菌生物学特性。 2.掌握肉毒梭状芽孢杆菌及肉毒毒素的致病性。 3.掌握肉毒梭状芽孢杆菌及肉毒毒素检验的检验程序。 * 一、生物学特性 （一）培养特性 最严格的厌氧菌 生长最适温度：28 ℃ ～37 ℃ ：pH为6.8~7.6，产毒的最适pH为7.8 ~8.2。 产毒培养温度：不同菌型产毒的最适培养温度不完全相同。C、D型温度高些为宜，35℃ 培养3d即可，而E型菌低温度长时间培养效果较好。 对营养要求不高 ：在普通培养基上都能生长。 肉毒梭状芽孢杆菌菌落 在固体培养基表面上，形成类圆形，边缘不整齐，约3毫米左右的菌落。菌落半透明，表面一般比较光滑也有的呈颗粒状，界线不明显，向外扩散。呈绒毛网状，常常扩散成菌苔。 * 肉毒梭菌的生化性状很不规律，即使同型，也常见到株间的差异。 （二）生化特性 1、生化特性很不规律； 2、一般能分解葡萄糖、麦芽糖、果糖产酸产气； 3、对麦角、凝固血清、凝固蛋白有水解作用，并引起液化； 4、不形成靛基质。能产生硫化氢。 * （三 ）致病性 1、致病物质：肉毒毒素是已知最剧烈的神经外毒素（对人致死量为0.1ug）。肉毒毒素经胃肠道吸收入血后，作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经－肌肉神经接头处以及自主神经末梢，阻碍乙酰胆碱的释放，引起运动神经末梢功能失调，导致肌肉麻痹。 2、所致疾病： （1）食物中毒：由于肉毒梭菌芽胞污染食品，未经彻底消毒，在厌氧条件下繁殖产生毒素，食前又未加热烹调而发生食物中毒。临床表现胃肠道症状较少，在整个病程中病人神智清楚并不发热,。出现复视、斜视、眼睑下垂等眼肌麻痹症状；再是吞咽、咀嚼困难、口齿不清等咽部肌肉麻痹症状，进而膈肌麻痹、呼吸困难、直至呼吸停止而导致死亡。 （2）创伤感染中毒 　　 （3）婴儿肉毒： 因食入被肉毒梭菌芽胞污染的食品（如蜂蜜）后发生中毒，早期症状为便闭，吸吮啼哭无力、眼睑下垂等。病死亡率不高。 * 二、检验程序 检样 毒素检测 增菌产毒培养 30℃，5d 观察生长性状染色镜检 毒素检测 报告（二） 分离培养 观察菌落性状染色镜检 毒素检测 培养检查 报告（三） 报告（一） 增菌产毒培养 30℃，5d * 1、肉毒梭状芽孢杆菌的培养特性是什么? 2、肉毒梭状芽孢杆菌的生化特性是什么? 思考题 注意事项 为检出蜂蜜中存在的肉毒梭菌，蜂蜜检样需预温37℃（流质蜂蜜），或52℃~53℃（晶质蜂蜜）充分搅并后立即称取20g溶于100mL灭菌燕馏水（37℃或52℃~53℃），搅拌稀释，以8000r/min~10000r/min，离心30min（20℃），沉淀，加灭菌蒸馏水1mL，充分摇匀．等分各半，接种应肉培养基8ml~10mL各一支，分别在30℃及37℃下厌氧培养7d，按肉毒梭菌检出（增菌产毒培养试验）方法进行肉毒毒素检测。 * 第六节 副溶血性弧菌检验 学习目的与要求 1. 掌握副溶血性弧菌的生物学特性。 2.掌握副溶血性弧菌的致病性。 3.掌握副溶血性弧菌的检验程序。 * （一）培养特性 需氧或兼性厌氧 嗜盐，在2~３%NaCL培养基中生长最好，无盐或食盐10%不能生长。 最适温度36℃，pH7.5~7.8 在固体培养基上菌落呈圆形凸起，混浊不透明，表面光滑，较湿润，边缘不整齐。 在血平板上可见溶血环。 一、生物学特性 * （二）、生化特性 分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖，蔗糖。 H2S（－）、V-P（－）、靛基质（+）、精氨酸（－） 甲基红（+）、赖氨酸（＋）、溶血＋/- * （三）、致病性 1、致病因素 ★脲酶 ★产生溶血毒素：耐热性溶血毒素(THD)和耐热性溶血毒素相关的溶血毒素(TRH)，此外有的可产生不耐热溶血毒素(TLH)。 2、所致疾病 食物中毒、急性胃肠炎、败血症等。 * 36±1℃ 8~18h 样品25g(25mL)+225 mL3％氯化钠碱性蛋白陈水 硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂或科玛嘉弧菌显色培养基划线分离 36±1℃ 18~24h 挑取可以菌落，接种于3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 3％氯化钠碱性蛋白陈水3管×3个合适的稀释度如果进行定