无菌微生物手册3-1(NXPowerLite).doc

第三部分 工程卫生检测 一、目的： 涉及食品接触表面等的卫生状况，建立生产环境卫生状况的评价体系，为生产单位提供环境卫生控制有效性的证据，指导生产单位加强薄弱环节的卫生控制。 第一章 空气清洁度评价（沉降菌） 1.目的： 在食品生产环境中，必须保持洁净的空气，才能防止和减少来自空气的污染，对食品生产的环境进行空气的微生物学监测，是评价食品生产环境卫生、加强管理，保证食品质量的一项重要措施。 2.仪器试药： 2.1仪器 2.1.1培养皿。（Φ90mm×15mm） 2.1.2保温箱(36±1℃)。 2.1.3高压消毒锅 2.2试药： 2.2.1营养琼脂培养基或其它药典认可的培养基。 3.培养基的准备 3.1将已杀菌的培养基加热溶化，冷却至45℃时，在无菌操作环境要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3.2待培养基凝固后，将培养基平皿倒置于36±1℃恒温培养箱中培养48h，若培养基平皿上确实无菌落生长，即可供采样用。 3.3经过3.2确认后准备好的培养基平皿需要在2℃---8℃的环境中存放。 4.测试方法： 4.1采样方法： ● ● ● ● ● 4.1.1将已经制备好的培养皿按照下图要求进行放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中30min（清洁要求低于10万级水平，空气沉降菌检测只需要暴露5min），再将培养皿盖盖上后倒置保存。 4.1.2工作区采样点的位置应离开地面0.8m---1.5m，离开墙面1m以上。 4.1.3对于清洁区，如要求达到万级、10万级以上，则测试应该在空调系统正常运行不少于30min后开始。 4.1.4沉降法最少采样点数目： 饮料充填和调配区取样点均为5个；食品内包装区采用每条线1个培养皿进行取样。 4.1.5培养皿不可放置在最清洁或最肮脏的地方或是出风口或粉尘多之处。 4.2图片实例：： 1.将￠9cm培养皿打开暴露在空气中 2.放置30分钟(具体时间视标准执行) 3.培养皿放置定位线 4.测霉菌酵母菌所用的虎红培养基 4.3培养： 4.3.1全部采样结束后，将培养基倒置于恒温培养箱中，采用36±1℃培养48h以上。 4.3.2每批培养基应有对照试验，检验培养基、培养皿是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。 4.3.3菌落计数： 使用菌落计数器观察计数，然后使用5—10倍放大镜检查，不得遗漏。 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。4.4记录：测试报告的编写采用《沉降菌测试报表》 4.5菌落计算： 4.5.1用计数方法得出各个培养皿的菌落数。 4.5.2平均菌落数的计算： M= M1＋M2＋M3＋…Mn n 式中：M：平均菌落数 M1：1号培养皿菌落数 M1：2号培养皿菌落数 Mn：n号培养皿菌落数 N：培养皿总数。 5.注意事项： 5.1测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、准确性。 5.2采取一切措施防止人为对样本的污染。 5.3 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并需要注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5.4采样前需要检查每个培养皿的质量，如果发现变质、破损或污染等应剔除不用。 6.空气清洁度评价： 参考《微生物工程检查》 7.参考资料： 《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》 GB/T 16294-1996 《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1-2000 8.相关记录表单： 沉降菌测试报告 取样日期： 报告日期： 培养温度： 采样人员： 平皿 区域123456平均标准判定备注部主管： 课主管： 组长： 检验员： 会受检单位： 第二章 手部清洁度评价（手部微生物检测） 1.检测范围： 1）食品生产部、TP生产部、PET生产部清洁区。 2）食堂料理人员。 2.检测频率： 1）生产部清洁区、准清洁区作业人员：1次/月（由品保人员每月不定期检测） 2）食堂料理人员：1次/月。 3.采样方法：将生理盐水以10毫升分装入试管中连同包好的棉签用高压灭菌器灭菌备用。被检人五指并拢，用一浸湿生理