2017湖南省新田县高三生物二轮复习 专题8 第3讲 植物的组织培养技术学案.docVIP

第3讲 植物的组织培养技术 考点一 菊花的组织培养 一、基础知识 1、植物组织培养的理论基础： 植物细胞的全能性 ，基本过程： 脱分化 、 再分化 。 外植体 ———→ 愈伤组织 ———→ 试管苗 ———→ 完整植株 2、愈伤组织：细胞排列 疏松 而无规则，是一种高度 液泡化 的呈 无定形状态 的薄壁细胞。 二、影响植物组织培养的条件 1、材料因素： 植物的种类 、 材料的年龄 和 保存时间的长短 等都会影响实验结果。 如：菊花组织培养一般选择 未开花 植物的茎上部 新萌生的侧枝 作材料。 一般容易进行 无性繁殖 的植物，也容易进行组织培养，如：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季等。 2、常用的培养基是 MS培养基 。含大量元素、微量元素、有机物（如 蔗糖 等） 3、植物激素的影响：主要是 生长素 和 细胞分裂素 。 使 用 顺 序 不 同 使用顺序 实验结果 用 量 比 例 不 同 生长素／细胞分裂素比值 发育方向 先生长素， 后细胞分裂素 有利于分裂 但不分化 比值高时 利于根分化， 抑制芽形成 先细胞分裂素， 后生长素 细胞既分裂 也分化 比值低时 利于芽分化， 抑制根形成 同时使用 分化频率提高 比值适中 促进愈伤 组织生长 4、其它条件：菊花组织培养，将pH在 5.8 左右，温度 18～22℃，并且每日用日光灯照射 12h 。 三、实验操作 1、制备MS固体培养基：（一般使用 4℃ 保存配制好的培养基 母液 来制备） （1）配制各种母液：按配方比例配制成的 浓缩液 ，使用时根据母液的浓缩倍数 加蒸馏水稀释 。 （2）配制培养基：（由于菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。） （3）灭菌方法： 高压蒸汽灭菌 。 2、外植体的消毒：进行表面消毒时，既要考虑药剂的 消毒效果 ，又要考虑植物的 耐受能力 。 3、接种→培养→移栽和栽培：移栽试管苗之前，让在培养间 生长几日 ，再清洗掉根部的 培养基 ， 将幼苗移植到消过毒的 蛭石 或 珍珠岩 生活一段时间，再栽培到土壤中。 四、教材思考题及答案 1、在选取菊花茎段时，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？ 答：因为生长旺盛的嫩枝生理状况好容易诱导脱分化和再分化愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是。组织培养过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗，而与配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是（脱落酸、2，4－D）。 （1）利用月季的花药离体培养产生单倍体时,选材非常重要。一般来说，在 期花药培养的成功率最高，为了选择该时期的花药，通常选择 的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有 法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用 法，该法能将花粉细胞核染成 色 （2）的植物的基因型为AaBb（两对基因遵循自由组合定律遗传），则①的基因型为 ，②的基因型可能为 。 （3）图示中⑦、⑧所指的结构依次是 、 ，两者的基因型 。 【答案】（1）单核 完全未开放 醋酸洋红 焙华青-铬矾法 蓝黑色 （2）AaBb Ab或aB或AB或ab （3）花粉管细胞核 生殖细胞核 相同 1、（1）植物细胞的全能性 外植体消毒 （2）浓缩倍数 高压蒸汽 （3）① 30g/L 该浓度的蔗糖既较好的调节培养基的渗透压，又为细胞提供充足的碳源（和能源） ② 脱分化（去分化） 先使用细胞分裂素，再使用生长素 ③ 培养基渗透压过大，导致细胞渗透失水而死亡 2、（1）固体 不必（3）消毒 灼烧 外植体消毒不彻底 培养基灭菌不彻底（接种时操作不规范等其他合理答案也给分） （）细胞分裂素比例较高　生根　细胞分裂素　2，4－D 1 移栽 再分化 脱分化 (去分化)