hiv抗体检测技术规程 课件.pptVIP

《抗菌药物临床应用指导原则2015解读奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用鼻出血的护理课件鼻中隔偏曲病人的护理查房 阿尔茨海默症防治相关知识埃及的金字塔有建造方法动画艾司洛尔在神经外科重症中的应用二级二班防溺水等安全教育 《抗菌药物临床应用指导原则2015解读奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用鼻出血的护理课件鼻中隔偏曲病人的护理查房 阿尔茨海默症防治相关知识埃及的金字塔有建造方法动画艾司洛尔在神经外科重症中的应用二级二班防溺水等安全教育 HIV抗体检测实验室技术规程 天津市CDC HIV确证中心实验室 郑敏娜 2013.6.25 HIV病毒感染人体过程及免疫学机制 明确HIV感染者（诊断） 控制传播 及早医学干预 血液筛查 流行病学调查、高危人群监测 开展VCT的基础 职业保护 HIV抗体检测在艾滋病防治中的作用 主要内容 HIV抗体检测的相关规范性文件 HIV抗体检测的方法和注意事项 HIV抗体确证实验的相关规程和结果解释 目前我市HIV筛查实验室中存在的问题 HIV抗体检测的相关规范性文件 《医疗机构临床实验室管理办法》卫医发〔2006〕73号 《全国艾滋病检测工作管理办法》卫疾控发〔2006〕218号 《全国艾滋病检测技术规范(2009年版)》 HIV抗体检测的相关规范性文件 《全国艾滋病检测工作管理办法》卫疾控发〔2006〕218号 检测工作要求第十二条　艾滋病检测实验室应在规定的职能范围内开展检测工作，遵守国家法律、法规和有关规范。检测技术及程序应符合《全国艾滋病检测技术规范》的要求。 HIV抗体检测的方法和注意事项 HIV抗体检测的主要方法——金标准 包括初筛实验和确证实验 初筛实验: 试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准，在有效期内的，批批检合格 敏感性和特异性好： 方法包括：ELISA，化学发光法和快速检测法（免疫层析，颗粒凝集等方法） 样本：血清、血浆；干血斑；唾液；尿液 HIV抗体检测的方法和注意事项 快速免疫层析 明胶颗粒凝集法（PA） HIV ELISA 试剂质量评估：/n16/n1193/n4073/719991.html 严格遵照试剂说明书进行试验检测 正确使用仪器设备 正确判读试验结果 作好实验记录 试验操作注意事项 HIV抗体检测技术要求 建立标准操作程序 禁止肉眼判读！ 保证酶标仪，洗板机正常运转 保证加样器准确 选择高质量的与加样器配套的TIP头 使用有效期内的试剂 保证样品质量 影响ELISA测定的因素 试剂盒的因素：妥善保存试剂 在有效期内使用 试验操作 形成良好的操作习惯：加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 严格按试剂说明书操作:空白孔不加样品和酶标试剂 操作过程中集中精力：避免加样错误 注意事项 保证实验室温度，室温过低有可能造成吸光度值偏低。 ELISA试验的敏感性很高，如果操作不当很容易出现非特异性反应。在操作过程中，尤其应注意洗涤过程。洗涤彻底可减少假阳性的机会。 进行ELISA试验时，必须用酶标仪进行测定，不得目测结果。使用酶标仪时，要避免酶标孔内产生气泡，影响判读结果。 ELISA操作中的注意事项 试剂准备 加样 温育 洗板 显色 比色 操作示范请看教学片 ELISA试验假阳性产生原因？ 样品加错位置，标本搞错 洗板机设置不当，洗板时洗涤液溢出，污染其它孔 洗板机内部管道有真菌生长 实验中，实际孵育时间过长，温度过高 待测标本溶血或含有血细胞。 待测标本长菌或其它原因混浊。 其它原因：〔与试验操作无关〕． HIV抗体筛查和复检的流程 与2004版检测规范的不同 报告HIV抗体检测阴性 HIV感染产妇所生婴幼儿的抗体检测 HIV抗体确证实验的相关规程和结果解释 复检阳性或一阴一阳的样本 确认实验 送确认前，应核对身份，补充个人信息（姓名，身份证号等） 填写”HIV抗体复检检测单” 样本“三级包装” 第一层：带盖的试管 第二层：防水，防漏 第三层：包装箱（内附缓冲材料） HIV抗体确认实验 包括： 免疫印迹实验(WB) 条带免疫试验(LIA) 免疫荧光试验(IFA) 放射免疫沉淀试验(RIPA) HIV抗体确认实验结果 a 强阳性对照（HIV-1和HIV-2） b弱阳性对照（HIV-1） c阴性对照 d典型的HIV-2血清阳性反应 a b