2.第二章节 基因工程的酶学基础.pptVIP

;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;ii）同一个DNA分子内连接： 通过两个相同的粘性末端可以连接成环形分子。 ;;; 杂种位点（hybrid site）由一对同尾酶分别产生的粘性末端共价结合形成的位点。 一般不能被原来的任何一种同尾酶识别。 BamHⅠ G GATC C BclⅠ T GATC A C CTAG G A CTAG T 杂种位点 ：T GATC C （ BamHⅠ ） （ BclI ） A CTAG G ;;;II 型核酸内切酶的多酶联合酶解： 若缓冲液条件相同，可同时加入同时酶切 2) 若缓冲液条件不同，可采取下列方法： 使用较贵的酶的盐浓度，加大便宜酶的用量，同时酶解 低盐酶先切，然后补加盐，高盐酶再切 一种酶先切，然后更换缓冲液，另一种酶再切（抽提或胶回收）;;;;;;;;;;;;;;;;关于“Gap”与“Nick”的概念。 1.Gap裂口：即DNA裂口，是指双链DNA分子上的某一条链失去一个或数个核苷酸时所出现的DNA单链断裂。 Gap in DNA is the absence of one or more