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第7章 蛋白质的分离纯化与相关表征.ppt
生物化学 第七章;一、Protein的酸碱性质;4、等电点获得途径;二、蛋白质相对分子量测定;二、蛋白质相对分子量测定;三、Protein的胶体性质蛋白质的沉淀;盐析法（破坏水化层）：中性盐分级沉淀法，常用的盐为硫酸铵。不同的蛋白质由于所带的电荷和水化程度不同，盐析时所需的盐的浓度也不相同，因而可以将不同的蛋白质加以分离。一般不会因为蛋白变性，除盐后可复性。
有机溶剂沉淀法（破坏水化层 ）：甲醇、乙醇、丙酮等，引起蛋白变性，可缩短处理时间减慢变性速度。
重金属盐沉淀法：溶液PH高于PI时，蛋白带有负电，容易与 Hg2+, Cu2+，Ag2+等产生重金属蛋白盐沉淀；
生物碱试剂酸类沉淀法：溶液PH低于PI时，蛋白带正电，容易与鞣酸、苦味酸、硝酸等的酸根负离子生成不溶性盐而沉淀；
加热变性沉淀法（破坏水化层）：蛋白质天然结构解体，疏水基外漏，破坏水化层，如豆腐的制作方法。;2. Protein的分离、纯化;;2.3根据分子大小-凝胶过滤 (gel filtration);蔗糖溶液;3. 根据电荷不同分离纯化
;高电荷;2D electrophoresis;5. 根据与配体的亲和力分离纯化;6. HPLCFPLC;五、蛋白质的含量测定与纯度鉴定;2. Folin-酚——Lowry法;4. Bradford 法
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