苯磺酸氨氯地平片剂含量HPLC测定.docVIP

苯磺酸氨氯地平片剂含量的HPLC测定 （单点校正法） 目的要求 学习高效液相色谱仪器的基本使用方法。 掌握单点校正法的色谱定量分析方法。 基本原理 　苯磺酸氨氯地平为抗心律失常药，临床主要用于治疗高血压和心绞痛。采用非极性的十八烷基键合相（ODS）为固定相和极性的甲醇－水溶液为流动相的反相分离模式适合于苯磺酸氨氯地平片剂含量的测定，空白辅料均无干扰。可以用单点校正法直接进行分析测定。 wi = ci = 实验条件 高效液相色谱仪（配紫外检测器），以色谱工作站联机控制仪器、处理实验数据。 超声波清洗机 进样器：手动进样器，100μL微量注射器 色谱柱：C18 0.5μm，250×4.6mm 分离条件 流动相比例：甲醇－0.03 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(65∶35) 进样量：20 μL 检测波长：237 nm 流动相流量： 1.0 mL/min 实验步骤 按仪器的要求打开计算机和液相色谱主机，调整好流动相的流量、检测波长等参数，用流动相冲洗色谱柱，直至工作站上色谱流出曲线为一平直的基线。 称取苯磺酸氨氯地平对照品约50 mg，置50mL量瓶中，加甲醇适量，超声10min使溶解，并加甲醇至刻度，摇匀得1.0 mg/mL贮备液。精密量取1.0 mg/mL贮备液5.0mL至50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀、过滤，得100μg/mL的对照品溶液。 取苯磺酸氨氯地平片剂10粒，研匀。精密称取适量（相当于苯磺酸氨氯地平5mg）置50mL容量瓶中，加流动相超声溶解，过滤，滤液作样品溶液。 分别取苯磺酸氨氯地平对照品和样品溶液20μL进样，记录色谱图。 根据对照品和样品的峰面积，用单点校正法计算苯磺酸氨氯地平片剂的含量。 五、问题讨论 1. 紫外检测器是否适用于检测所有的有机化合物？为什么？ 2. 为什么液相色谱多在室温下进行分离检测而气相色谱法相对要在较高的柱温下操作？ ? 实验目的： 学习氧化还原滴定法的原理与实验方法,各种滴定终点确定方法(V～E曲线法,二次微商法)。 实验原理： 用K2Cr2O7滴定Fe2+,其反应式如下： K2Cr2O7 +6Fe2+ +14H+→2Cr3+ +6Fe3+ + H2O 利用铂电极作指示电极,饱和甘汞电极作参比电极,与被测溶液组成工作电池。在 滴定过程中,随着滴定剂的加入,铂电极的电极电位发生变化。在化学计量点附近铂电极的电极电位产生突跃,从而确定滴定终点。 仪器和试剂: 仪器：饱和甘汞电极? 铂电极 pH—mv计? 滴定管（酸式） 搅拌磁 试剂：K2Cr2O7溶液（0.01mol/L）硫酸亚铁铵溶液二苯胺磺酸钠（指示剂） 实验步骤： 1．准备好铂电极和饱和甘汞电极；在滴定管中加入重铬酸钾标准滴定溶液。 2．试样的配制：在50mL烧杯中，将10mL Fe2+和8mL 3mol的H2SO4相混合；再加入几滴二苯胺磺酸钠作指示剂。3．用酸式滴定管装入0.01mol/L：K2Cr2O7溶液，排气泡，调零后置于铁架台上 4．试液中Fe2+含量的测定：开动搅拌磁子，待电位值稳定后读数。向烧杯中滴加K2Cr2O7 溶液，记录滴定剂为1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，4.4 mL,4.5 mL,4.6 mL,4.7 mL,4.8 mL,4.9 mL,5.0 mL,5.1 mL,5.2 mL,6.0 mL,7.0 mL,8.0 mL,9.0 mL处的电动势值。 5．关闭仪器和搅拌电源开关。清洗滴定管,电极,烧杯并放回原处。 6．根据数据，给出E-V曲线，确定滴定终点；用二次微商法确定终点，比较两种结果。 实验现象： 溶液因加入了指示剂，随着K2Cr2O7溶液的加入，溶液由无色变成浅绿色最后变成紫色，可帮助指示滴定终点。当K2Cr2O7溶液加入的体积达到4.8mL时，电位发生突跃。 实验结果： 1．实验数据记录如下： V（K2Cr2O7）（mL） 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 4.4 4.6 电位数（V） -388 -432 -456 -476 -504 -524 -542 ? 4.7 4.8 4.9 5.0 5.1 5.2 6.0 7.0 9.0 -559 -649 -719 -745 -762 -772 -789 -801 -813 ? 2．E-V曲线：曲线上拐点对应的体积即为滴定终点时所耗标准滴定溶液的体积。 根据此曲线，当体积为4.8mL时，发生突跃。此时电动势数值为-649V。根据体积可计算出Fe2+ 的含量为0.0288 mol/L. 3.二阶微商法(计算法)滴定体积 V1 Vep V2△2E/△V2 作E-V曲线所用数据 作ΔE/ΔV -V曲线所用数据 作Δ2E/ΔV 2-V曲线所用数据 加K2Cr2O7溶液体积V/mL E-mV ΔE