微生物第七单元.pptVIP

（5）代谢质粒（Metabolic plasmid） 质粒上携带有有利于微生物生存的基因，如能降解某些基质的酶，进行共生固氮，或产生抗生素（某些放线菌）等。 将复杂的有机化合物降解成能被其作为碳源和能源利用的简单形式，环境保护方面具有重要的意义。 降解质粒： 假单胞菌： 具有降解一些有毒化合物，如芳香簇化合物(苯)、农药(2,4dichlorophenoxyacetic acid)、辛烷和樟脑等的能力。 （6）隐秘质粒（cryptic plasmid） 隐秘质粒不显示任何表型效应，它们的存在只有通过物理 的方法，例如用凝胶电泳检测细胞抽提液等方法才能发现。 它们存在的生物学意义，目前几乎不了解。 在应用上，很多隐秘质粒被加以改造作为基因工程的载体 （一般加上抗性基因） 变量实验（fluctuation analysis） Salvador Luria and Max Delbruck（1943） Salvador Luria Max Delbruck The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1969 变量实验（fluctuation analysis） Newcombe的涂布实验（1949） 影印实验（replica plating ） Joshua Lederberg and Esther Lederberg（1952） Joshua Lederberg J. Lederberg is awarded the Noble Prize in Medicine and Physiology in 1958 普遍转导（generalized transduction） 噬菌体可以转导供体菌染色体的任何部分到受体细胞中的转导过程 普遍性转导的三种后果： 外源DNA被降解，转导失败。 进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换 而形成稳定的转导子 流产转导 完全普遍转导 转导DNA不能进行整合、重组和复制，但其携带的基因可经过转录而得到表达。 因此群体中仅一个细胞含有DNA，而其它细胞只能得到其基因产物，在选择培养基平板上形成微小菌落 流产普遍转导 局限转导 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上 宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时， 在前噬菌体二侧的少数宿主 基因因偶尔发生的不正常切 割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 温和噬菌体λ裂解时的不正常切割：包含gal或bio基因 缺陷噬菌体DNA分子在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒，但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力，感染受体细胞后，通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的局限转导子。 低频转导 低频转导 裂解物 正常噬菌体 极少量的部分 缺陷噬菌体 （局限转导噬菌体） 转导颗粒 局限转导子 （极少量） 低感染复数 高频转导 低频转导 裂解物 正常噬菌体 极少量的 部分缺陷噬菌体 （局限转导噬菌体） 转导颗粒 三次感染，三次整合，一次切割，两次复制，两次裂解，两次转导 高感染复数 双重溶源菌 缺陷噬菌体和正常噬菌体同步复制 高频转导 裂解物 部分缺陷噬菌体 （局限转导噬菌体） 正常噬菌体 等量 转导颗粒 局限转导子 （大量） 低感染 复数 局限转导与普遍转导的主要区别： a）局限转导中被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接，与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞中。而普遍性转导包装的可能全部是宿主菌的基因。 b）局限性转导颗粒携带特定的染色体片段并将固定的个别基因导入受体，故称为局限性转导。而普遍性转导携带的宿主基因具有随机性。 溶源转变是一个与转导相似又不同的现象 温和噬菌体感染细胞后使之发生溶源化，因噬菌体的基因整合到宿主染色体上，而使后者获得了新性状的现象。 溶源转变的特点： 1、噬菌体不携带任何供体菌的基因； 2、噬菌体是完整的，而不是缺陷的； 3、噬菌体基因的整合到宿主染色体上导致宿主获得 新性状，无通过基因重组而形成的稳定转导子； 4、宿主获得新性状具有不稳定性 复制子 限制性内切酶位点 选择性遗传标记 可大量增殖 载体的特性 常用载体 原核受体细胞： 松弛型细菌质粒、λ噬菌体 真核细胞受体： SV40病毒（动物）、Ti质粒（植物） 二、真核微生物的基因重组 （一）有性杂交 细胞（ ＋） 细胞（－） 有性接合 染色体重组 新遗传型 能产生有性孢子的酵母菌、霉菌和蕈菌都可以进行有性杂交 （二）准性杂交 细胞（ ＋） 细胞（＋） 准性接合 基因重组