甾体激素类药物的分析4精品.ppt

C.水分、温度、O2与光线的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ O2与光线对反应的影响不大 t℃ ↑ → ν↑ D.酸的种类和浓度及异烟肼的浓度 酸:异烟肼 = 2:1 盐酸浓度0.0074mol/L 最大A 异烟肼浓度0.00365mol/L （1）原理 λmax=465 3、Kober反应比色法 △ △ 桃红 黄色 雌激素 2 O H 乙醇 - 4 2 SO H λmax=515 雌二醇-3-甲醚 λmax=465 λmax=515 [(NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] 铁－酚试剂 Iron-phenol Reagent 铁盐的作用 加快黄色产物的形成、转化 加强红色产物的稳定性 酚的作用 加快红色产物的形成 消除反应产生的荧光 练习与思考 [A型题] 1. 醋酸地塞米松的鉴别方法是 A.三氯化铁反应 B.水解反应 C.柯柏反应 D.与碱性酒石酸铜试液反应 E.双缩脲反应 [B型题] A.亚硝基铁氰化钠反应 B.Vitali反应 C.Kedde反应 D.绿奎宁(thalleiaqllin)反应 E.碱试酒石酸铜试液的反应 1. 黄体酮 2. 醋酸地塞米松 3. 地高辛 4. 硫酸奎宁 A E C D 简答题： 1、简述异烟肼比色法测定甾体类激素药物含量的原理及注意事项？ 2、简述四氮唑比色法中的注意事项。 3、甾体类激素药物可能含有哪些特殊杂质？各采用什么方法检查？ 4、甾体类激素药物有哪些鉴别方法？ 有机氟 Fˉ 有机破坏 有机氯 5、卤元素的呈色反应 茜素氟蓝—硝酸亚铈 硝酸—硝酸银 呈蓝紫色 Clˉ AgCl 氯原子结合在母核环上 6、沉淀反应 （1）与碱性酒石酸铜（斐林试液）的沉淀反应 （2）氨制AgNO3（多伦试液）的沉淀反应 （3）与AgNO3的沉淀反应 适用：含炔基的甾体激素类药物（炔雌醇、炔诺酮）。 机理： ↓ HNO3 + + NaOH滴定，电位法指示终点 （4）与HNO3-AgNO3的沉淀反应 适用：甾体激素类药物C21位上有氯原子取代，如丙酸氯倍他索。 机理： 有机氯原子 水解 加热 无机氯原子 结合在母核 环上的氯原子 氧瓶燃烧法 破坏 无机氯原子 硝酸—硝酸银 AgCl 原理：一些甾体激素类药物具有醋酸酯、戊酸酯及已酸酯的结构，可先行水解，根据水解产物来鉴别。 7、水解产物的反应 适用： 本类药物C3、C17或C21位上羟基的酯 结果： 醋酸酯水解后生成的醋酸可与乙醇反应，生成有香气醋酸乙酯。 戊酸或己酸酯类水解后可生成有特臭的戊酸或己酸，进行鉴别。 三、制备衍生物测熔点 （二）酯的水解 醇制KOH 水解 m.p.为150℃~ 156℃ （一）酯的生成 + KOH 丙酸睾丸素 睾丸素 m.p.为201℃ + m.p.约182℃（分解） （三）缩氨基脲的生成 苯丙酸诺龙 苯丙酸诺龙缩氨脲 H2NCONHNH2 （四）酮肟的生成 炔诺酮 HONH2 炔诺酮肟 m.p.约195℃（分解） 醋酸泼尼松 △４-3-酮 （五）UV-ViS分光光度法 240nm左右 280nm左右 苯环 其他共轭结构 原 理 200-760nm有特征吸收。 方 法 可规定最大吸收波长、A、吸收系数、A大/A小。 示 例 曲安息龙 丙酸倍氯米松 溶剂 甲醇 乙醇 浓度 20μg/ml 20μg/ml 结果判断 在238nm处有最大吸收 在239nm处有最大吸收，A为 0.57～0.60，在239nm与263nm 处的吸收度比值为2.25～2.45 结构特征： 酚羟基 C17 –OH C17 –乙炔基 eg1:炔雌醇 （六）IR法 原料药 1505cm-1 3505cm-1 3300cm-1 ν 1590cm-1 3610cm-1 酚羟基 醇羟基 1615cm-1 苯环的骨架振动 eg2：黄体酮 △４-3-酮 结构特征： C17-酮基 1700cm-1 ?C=O 20位酮基 1665cm-1 3位酮基 1615cm-1 870cm-1 ?C-H 双键 七、TLC法 八、HPLC 应用 甾体激素类药物原料与制剂的鉴别 甾体激素类药物原料与制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏） 方法 对照品法 对照品法 结果判断 要求供试品溶液所显主